生物大分子分离与纯化的液相色谱方法有多种,离子交换色谱（IEC）和固定金属离子亲合色谱（IMAC）是其中广为应用的两种方法。本论文设计合成了两种以四唑为配体的新型IEC和IMAC固定相,并对生物大分子进行了分离与纯化,所取得的主要成果如下:1.采用γ-缩甘油醚基丙基三甲氧基硅烷活化的大孔硅胶与3-羟基丙腈反应,在氯化铵的催化下再与叠氮钠通过3+2环加成反应制得了一种以四唑为配体的硅胶基弱阳离子交换色谱固定相。系统的考察了生物大分子在固定相上的分离能力、保留行为、负载容量及柱效稳定性等色谱性能。结果表明,5种标准蛋白可以被很好的分离,保留行为符合离子交换色谱模式;该固定相具有负载量高,稳定性好,不可逆吸附小等优点。将四唑配体固定相色谱柱用于鸡蛋清中溶菌酶的一步纯化,纯化的溶菌酶纯度为89.6%,活性可达66.823 IU/mg。2.采用γ-氨基丙基三乙氧基硅烷活化的大孔硅胶与3-氯丙腈反应得到腈基硅胶,再在氯化铵的催化下与叠氮钠通过3+2环加成反应首次制备了一种四唑配体金属离子亲合色谱固定相。研究了蛋白质在螯合Cu²⁺、Ni²⁺、Co²⁺固定相上的分离和保留行为。结果表明,固定相螯合上金属离子后,4种蛋白可以达到更好的分离效果,保留行为符合IMAC保留机理。