【摘 要】
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目的:观察健脾平喘汤对卵清蛋白所诱导的支气管哮喘小鼠模型气道炎症水平及miR-146a表达的影响。方法:选取清洁级健康BALB/c小鼠,共60只,随机分为空白组、模型组、健脾平喘高、中、低剂量组及对照组。除空白组外、余下每组均行OVA腹腔注射,结合雾化吸入激发法复制支气管哮喘小鼠。造模期间各组分别给予相应的药物灌胃治疗。采用HE染色观察气道炎症水平、PAS染色观察杯状细胞增生情况、Kwik-Dif
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目的:观察健脾平喘汤对卵清蛋白所诱导的支气管哮喘小鼠模型气道炎症水平及miR-146a表达的影响。方法:选取清洁级健康BALB/c小鼠,共60只,随机分为空白组、模型组、健脾平喘高、中、低剂量组及对照组。除空白组外、余下每组均行OVA腹腔注射,结合雾化吸入激发法复制支气管哮喘小鼠。造模期间各组分别给予相应的药物灌胃治疗。采用HE染色观察气道炎症水平、PAS染色观察杯状细胞增生情况、Kwik-Diff染色法对BALF中炎症细胞及各分类细胞进行计数,酶联免疫吸附测定法检测小鼠肺泡灌洗液IL-4、IL-5、IL-13及IgE水平,RT-PCR检测小鼠肺组织miR-146a表达。结果:1.小鼠一般状态雾化前各组小鼠精神状态良好,雾化激发后观察发现,空白组小鼠一般状态良好,模型组小鼠自雾化激发后,观察发现小鼠精神变差,逐渐呼吸变为急促、出现喘息等表现。随着激发频次的增多,小鼠可出现饮食不振,体质量下降等表现,而健脾平喘汤各剂量组及地塞米松组小鼠的临床症状相对减轻。2.HE染色空白组小鼠肺组织结构正常,未见显著炎症细胞的浸润;外周血管可见散在炎症细胞浸润;模型组小鼠支气管外周可见大量的炎症细胞浸润,支气管管腔变窄,炎症评分水平升高;与模型组比较,健脾平喘汤各剂量组及对照组小鼠肺组织炎性细胞浸润水平下降,管腔大小如常,炎症评分显著下降（P＜0.01）。3.PAS染色空白组小鼠气道可见极少量杯状细胞存在,且无明显黏液分泌。模型组小鼠气道可见大量杯状细胞增生,且存在大量黏液栓,PAS评分与空白组相比显著上升（P＜0.01）。健脾平喘低剂量组,PAS评分与模型组比较无明显变化（P＞0.05）健脾平喘中、高剂量组及地塞米松组小鼠中气道杯状细胞增生减轻,PAS评分与模型组相比明显下降（P＜0.01）。4.BALF中细胞的计数与空白组比较,模型组BALF炎性细胞总数明显上升（P＜0.01）;与模型组相比,健脾平喘低剂量组BALF炎性细胞总数无明显变化（P＞0.05）;健脾平喘汤中、高剂量组及地塞米松组小鼠BALF中炎症细胞总数减少（P＜0.01）;瑞氏吉姆萨染色结果证明,与空白组比较,模型组中BALF细胞数量上升（中性粒细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞）（P＜0.01）;与模型组相比,健脾平喘汤高剂量组、中剂量组及阳性药物组小鼠BALF嗜酸粒细胞总数明显下降（P＜0.01）;健脾平喘汤中、高剂量组及地塞米松组小鼠BALF中中性粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞数量无明显变化（P＞0.05）。健脾平喘汤低剂量组小鼠BALF中的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞总数与模型组相比无明显变化（P＞0.05）。5.BALF炎症因子ELISA检测结果示,与空白组比较,模型组小鼠BALF中IL-4、IL-5、IL-13及特异性IgE水平显著上升（P＜0.01）;与模型组比较,健脾平喘汤中剂量组、高剂量组及阳性对照组小鼠BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平下降（P＜0.01）,健脾平喘低剂量组小鼠BALF内的IL-4、IL-5及IL-13水平较模型组比较,无显著统计学意义（P＞0.05）。6.miR-146a 表达PCR结果示,与空白组比较,模型组小鼠肺组织中的miR-146a水平下降（P＜0.01）;与模型组相比,健脾平喘汤中剂量组、高剂量组及阳性对照组小鼠肺组织miR-146a水平上升（P＜0.01）,而健脾平喘汤低剂量组小鼠肺组织中miR-146a水平模型组相比差异无显著统计学意义（P＞0.05）。结论:1.健脾平喘汤能够降低哮喘模型小鼠肺组织的慢性炎症水平及呼吸道中杯状细胞分泌。2.健脾平喘汤能够减轻哮喘小鼠BALF炎症细胞数量、IL-4、IL-5、IL-13和OVA特异性IgE表达。3.健脾平喘汤通过上调miR-146a表达,抑制哮喘小鼠气道炎症。
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