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自1995年以来，我国一些地区相继发生了一种以鸡体慢性消瘦，腺胃严重肿大，腺胃乳头出血、溃疡为特征的疾病，给养鸡业造成了巨大损失。为了研究中国IBV分子流行病学的背景及遗传变异背景，为了在分子水平上探讨IBV组织嗜性变化的机理。我们把鸡传染性支气管炎中国地方分离株“致腺胃病变型”毒株CK／CH／LDL／97Ⅰ作为研究对象，应用RT-PCR方法扩增了CK／CH／LDL／97I株的病毒基因组3′的结构蛋白(S，M，N，E)基因和非结构蛋白(3a，3b，5a，5b)基因，并进行克隆、序列测定和遗传变异分析。同时将IBV CK/CH／LDL97Ⅰ／97株通过鸡胚连续传115代致弱成一株免疫原性良好的疫苗株(备注：F115的鸡胚传代由本实验室荣骏弓研究员完成)。通过比较鸡胚传代毒第5代(F5)和第115代(F115)的致病性，以期揭示鸡胚传代致弱过程中致病力变化的规律。实验结果表明如下： 1．基因组的分子特性：CK／CH／LDL／97Ⅰ从S基因5′端到N基因3′端的核苷酸序列由6868个核苷酸组成，部分基因组序列分析表明CK／CH／LDL／97Ⅰ具有典型的禽冠状病毒S-3-M-5-N基因顺序。CK／CH／LDL／97ⅠS基因开放阅读框3501个核苷酸组成，编码一条1167个氨基酸残基组成的多肽。S基因编码产物裂解后形成的S1和S2亚单位分别由541和626个氨基酸残基组成。S基因推导氨基酸裂解识别位点序列为精氨酸-精氨酸-苏氨酸-甘氨酸-精氨酸(RRTGR)。CK／CH／LDL／97Ⅰ与参考毒株的S1基因序列比较发现，CK／CH／LDL／97Ⅰ与国内“腺胃病变型”分离株Q1(99.1％)、J2(98.9％)、T3(98.90％)的氨基酸同源性都很高。其氨基酸系统发育进化树分析发现，CK／CH／LDL／97Ⅰ与Q1、J2、T3属一个基因群；S2基因较S1基因保守，其变异主要表现为点突变：N基因ORF由1230核苷酸组成，无碱基的缺失与插入，但存在点突变，编码409个氨基酸，N基因进化树显示，CK／CH／LDL／97Ⅰ单独组成一群；M基因ORF由681个核苷酸组成，编码226个氨基酸，M基因进化树表明CK／CH／LDL／97Ⅰ的亲缘关系与国内毒株SD／97／02、CK／CH／LSHHF03较近；基因3序列分析表明ORF3a由174个核苷酸组成，编码57个氨基酸，ORF3b由195个核苷酸组成，编码64个氨基酸，ORF3c由309个核苷酸组成，编码102个氨基酸：基因5序列分析表明ORF 5a由198个核苷酸组成，编码65个氨基酸，ORF 5b由249个核苷酸组成，编码82个氨基酸，基因5进化树与M基因一致。以上结果表明：CK／CH／LDL／97Ⅰ属于我国近年出现的一种新的基因型IBV。 2．鸡胚传代与免疫致病力的变化：对F5和F115鸡胚半数感染量的测定结果表明，此病毒随着鸡胚传代次数的增加对鸡胚致病性逐渐增强。用鸡胚传代毒F5和F115分别接种15日龄SPF雏鸡后，结果显示，F5和F115对SPF雏鸡致病性差异很明显。F5接种的鸡群发病率为100％，死亡率为10％；F115接种的鸡群发病率和死亡率均为0％。从病毒分离检测结果看，F5和F115均能在鸡的上呼吸道中复制，F5接种的鸡群的上呼吸道带毒时间为15d左右；F115接种的鸡群的上呼吸道带毒时间为9d左右。从血清抗体检测结果看，F5与F115均能刺激机体产生血清抗体，SPF鸡对F5与F115感染均能产生良好的体液免疫应答，但循环抗体的滴度与抗感染力缺乏相关性。结果表明：CK／CH／LDL／97ⅠF115代鸡胚适应毒已经致弱，但具有免疫原性。可作为疫苗候选毒株。