论文部分内容阅读
本论文主要针对治理铜绿微囊藻的方法进行了研究,通过筛选有效抑制铜绿微囊藻的材料,确定材料的有效抑藻浓度,根据筛选试验的结果及实际使用的要求等选择其中几种材料进行抑藻剂的优化,以期对控藻药物的研发提供参考与指导意义。1.抑藻材料的筛选及抑制铜绿微囊藻最佳浓度的确定为了筛选抑制铜绿微囊藻生长的有效材料,确定其最佳的抑藻浓度。本实验采用藻类生物量测定方法之一——叶绿素a检测法来确定铜绿微囊藻的生物量,从而对抑藻材料的作用效果进行了定性研究;并采用二倍稀释法对筛选出的9种材料进行了最佳抑制浓度的测定。结果表明,大黄、黄连、土槿皮、蜜桔皮、马水桔皮、蜜柚皮、铁观音、大蒜液、水杨酸等材料能有效抑制铜绿微囊藻的生长;大麦茶、仙鹤草不能抑制铜绿微囊藻的生长。当蜜桔皮、蜜柚皮水提液浓度为6.25g/L,马水桔皮水提液浓度为3.13g/L,水杨酸浸提液浓度为128mg/L,铁观音、大黄浸提液浓度为5g/L,土槿皮、黄连提取物浸提液浓度为2.5g/L时对铜绿微囊藻的生长具有有效的抑制作用,且随着增加各浸提液浓度,其抑藻效果呈增长势态。本研究首次对筛选的材料进行最佳抑制浓度的测定,为水产养殖治理蓝藻提供了一定的参考,同时为控制蓝藻药物进一步研发奠定了基础。2.抑藻材料抑制铜绿微囊藻抑制作用的研究从第一章得出的9种有效抑藻材料中选择了蜜桔皮等柑橘类、水杨酸、大蒜,并研究了这三种材料对铜绿微囊藻的生理生化的几项指标的影响。结果表明,在第四天时常温处理下三种不同的柑橘果皮对铜绿微囊藻生长抑制率分别为85.83%、90.55%、90.55%,而高温处理下抑制率分别为71%、81%、77.42%;后者在第七天时抑制率达94.38%以上。水杨酸0.12g/L处理组中的叶绿素a在12h时含量较低,该组与对照组相比有明显的差异(P<0.01),且该组中藻蓝蛋白(PC)含量下降速度较快,在96h时几乎不能检测到;别藻蓝蛋白(APC)含量是上升的趋势;藻红蛋白(PE)含量基本维持在初始水平;总可溶性蛋白含量24h时已为对照组的66.7%,96h时仅为对照组的2.2%。大蒜6.4g/L处理组铜绿微囊藻的PC呈下降趋势;APC含量24h前变化比较平缓,随着时间延长APC含量有增长趋势;PE的含量变化不大;总可溶性蛋白含量48h时为对照组的45.0%,96h时已低至21.3%。本研究确定了柑橘类水提液中存在的有效抑藻成分在高温处理下能保持抑藻活性;证实了水杨酸、大蒜能影响铜绿微囊藻叶绿素a、藻胆蛋白各组分及可溶性蛋白的含量;藻类光合系统Ⅱ是水杨酸、大蒜抑制铜绿微囊藻生长的一个作用位点。3.抑藻剂的优化及稳定性研究根据前期研究,对第二章中的三种材料进行了正交实验,得到抑藻剂的最优组合,并对抑藻剂的性质稳定性进行研究。结果表明,正交实验得到的最优组合是A2B3C1,即抑藻剂的最适配方是蜜桔皮水提液用量6.25g/L,水杨酸(SYS)成分用量256mg/L,大蒜成分用量0.625g/L,且SYS对铜绿微囊藻叶绿素a含量影响起主导作用;常温及沸水加热20min、40min、60min时抑藻剂的抑藻效果无明显差异;抑藻剂存放在4℃时,能保持良好的抑藻活性,而在常温下则略次之,在-20℃时最差;在不同接种量的实验中,该抑藻剂能有效抑制OD680nm为0.4以下的铜绿微囊藻,且能影响藻胆蛋白各组分的组成,各个处理组中的PC含量均在逐步下降,APC含量略增长,而PE基乎保持不变,总可溶性蛋白含量降低。该优化抑藻剂能有效的抑制一定浓度下的铜绿微囊藻;藻类光合系统Ⅱ依然是抑制剂抑制铜绿微囊藻生长繁殖的一个作用位点。