沙田柚花柱S—糖蛋白的纯化及各器官特异蛋白的研究

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我们选取经过人工自花授粉3天后的沙田柚(CitrusgrandisVarShatirtyuHort)花柱为实验材料,切取1/2部位处花柱组织,研磨成匀浆后,进行抽提和硫酸铵盐析,得到35%级分的蛋白质粗提液,此液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,显示出9条蛋白带,其中靠近正极端的两条蛋白带占较大优势。此液经CoA—Sepharose4B亲和柱层析,特异峰(S~#)仅显示一条蛋白带,恰好是35%级分中近正极端的两种蛋白中的一种最优势蛋白。对其部分生化性质测定定结果为:该蛋白为碱性糖蛋白,糖含量为92%,SDS—PAGE的实验结果表明它由两个亚基组成,分子量分别为38.0kD、32.0kD,等电点分别约为7.2、6.9。此外,作者还对其进行了生物学活性测定,该糖蛋白能抑制离体(invitro)萌发白花花粉的花粉管的生长,并在一定范围内,加入的蛋白量越多,抑制作用也越强。以酵母rRNA为底物,测其核酸酶活性,酶活为118.3u/mg,这说明该糖蛋白有强烈降解RNA的能力。
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