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类胡萝卜素是柑桔果实重要色素,其组分与含量影响果实色泽和保健功效。柑桔类胡萝卜素分子研究多集中于合成途径的下游部分,对上游途径少有涉及。红肉脐橙积累高含量的类胡萝卜素,但其分子机制尚不清楚。本研究从甜橙中分离了1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS)和1-脱氧木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)基因片段,并对红肉脐橙和普通脐橙中7种类胡萝卜素合成基因的表达差异进行了分析。以甜橙成熟果实的果皮cDNA为模板,应用普通PCR获得DXS和DXR目标片断。所得片段长度分别为458bp和359bp,均位于编码区,分别编码152个和119个氨基酸。基于核苷酸序列,BLAST研究表明DXS和DXR与番茄、烟草等植物的相应基因同源80%以上。设计了DXS、DXR、八氢番茄红素合成酶(PSY)、八氢番茄红素脱饱和酶(PDS)、番茄红素ε-环化酶(LCY-e)和β-胡萝卜素羟化酶(BCH)这6种类胡萝卜素合成基因的实时PCR引物并建立了实时PCR体系。应用这6个基因以及实验室先前建立的番茄红素β-环化酶(LCY-b)基因实时PCR体系,以实验室先前建立的柑桔柠檬酸合成酶基因(CS)为内标,分别以红肉脐橙与普通脐橙成熟果实的果皮和果肉为材料,对这7个基因的表达丰度进行了分析。结果表明,在上述7个基因中,表达丰度最高的是BCH,可能是导致柑桔果实类胡萝卜素以叶黄素为主的原因。类胡萝卜素合成上游途径中PSY和DXR的表达丰度较强,而DXS的表达较弱,表明DXS可能是柑桔类胡萝卜素合成的限速位点。总体而言,红肉脐橙果肉中的几个基因表达丰度均高于普通脐橙,增幅达1-4倍。基于这些结果,初步认为红肉脐橙积累高含量的类胡萝卜素是多基因协同表达的结果。