卵巢癌(ovarian cancer)是妇科恶性肿瘤中死亡率最高的一类肿瘤,各种年龄均可发病。其中上皮性卵巢肿瘤占原发性卵巢肿瘤的50%-70%,其恶性类型占卵巢恶性肿瘤的85%-90%。因卵巢癌临床早期无症状,并且缺乏有效的早期诊断方法,所以70%的病例在确诊时已属于中晚期,手术的效果不理想或已经丧失手术时机；术后接受化疗5年生存率也仅30%-40%。而侵袭、转移及新生血管形成是卵巢癌最重要的生物学特征之一,也是卵巢癌患者治疗失败和死亡的直接原因。肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)又称扩散因子(scatter factor, SF),是一种多效性生长因子,由间质细胞所分泌。最初仅被认为是肝细胞增殖的有丝分裂原之一,以后逐渐发现它具有促进肿瘤发展的多种功能,表现为刺激多种类型细胞的增殖、分化、侵袭和形态形成等多功能生物学效应,并参与胚胎发生、创伤愈合、器官再生、及炎症等多种病理生理过程。研究发现,在许多肿瘤组织中常可测得HGF的过度表达,通过破坏细胞间的连接,刺激癌细胞浸润,诱导肿瘤新生血管生长,从而参与多种肿瘤细胞的恶性生物学行为。胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor, IGF)具有胰岛素样促代谢作用,具有极强的促有丝分裂作用,是许多正常和肿瘤细胞凋亡的抑制物。IGF-Ⅰ是IGF系统中的一类多肽类生长因子,最初被称为促生长因子(Sm-c),大部分由肝脏产生,分布广泛。具有促进有丝分裂,刺激RNA和DNA的合成而促进细胞增殖和／或抑制细胞凋亡；诱导细胞内原癌基因的表达,启动细胞增殖分裂过程,促进癌细胞的生长并增强恶性肿瘤的侵袭力。基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)是Ⅳ型胶原酶的-种,以非活性形式由肿瘤组织产生,是肿瘤浸润和转移的主要因素,能促进肿瘤新生血管的形成；肿瘤细胞通过分泌MMP-2,从而降解肿瘤细胞周围的细胞外基质和基底膜,增强肿瘤细胞的侵袭及转移能力,影响着肿瘤的生物学行为,同时肿瘤细胞分泌的MMP-2可以降解毛细血管内皮层下的基底膜和细胞外基质,使内皮细胞向外迁移并增殖,最终形成新的血管和基底膜。目的本研究采用免疫组织化学SP法检测正常卵巢组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织和卵巢上皮性癌组织中IGF、IGF-I及MMP-2蛋白的表达,分析三者与卵巢上皮性癌细胞生物学特性间的关系,探讨其在卵巢癌发生发展中的作用。材料与方法1材料：收集郑州大学第三附属医院和河南省肿瘤医院自2008年7月～2009年5月行手术切除的卵巢组织共110例,所有标本都经10%的中性福尔马林固定,常规脱水,石蜡包埋。其中正常卵巢组织20例,卵巢良性上皮性肿瘤组织30例(其中浆液性乳头状囊腺瘤15例,黏液性乳头状囊腺瘤15例),卵巢上皮性癌组织70例。卵巢上皮性癌患者年龄19.0～82.0(51.9±13.5)岁,均为初发病例,术前均未接受放、化疗；组织学分级：G112例,G221例,G337例；FIGO分期：Ⅰ期10例,Ⅱ期14例,Ⅲ期43例,Ⅳ期3例；组织学分型：浆液性癌50例,粘液性癌20例；有淋巴转移者21例,无淋巴转移者49例。标本均经病理医师证实。2实验方法：本研究采用免疫组织化学SP方法检测刂HGF、IGF-I及MMP-2在卵巢上皮性癌组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达,根据染色强度及阳性细胞数量双评分法半定量积分。HGF蛋白主要表达于卵巢癌组织间质细胞及癌细胞的胞浆内为棕黄色或棕褐色颗粒,IGF-Ⅰ的阳性染色细胞为细胞浆内出现棕黄色颗粒,MMP-2以细胞膜或胞浆出现淡黄至棕黄色颗粒为阳性。采用SPSS13.0软件包进行统计分析,采用χ2检验,相关性分析采用Spearman相关性检验,以α=0.05为检验水准。结果1免疫组织化学SP法检测结果：HGF表达HGF在卵巢上皮性癌组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达率分别是65.7%、26.7%、15.0%(χ2=23.005,P<0.05),癌组织中与正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤表达有统计学意义；在卵巢上皮性癌组织中,HGF蛋白的阳性表达在临床分期Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期、有无淋巴结转移组织中的表达有统计学意义(P<0.05)；在不同年龄组、有无腹水及不同组织学分级差异无统计学意义(P>0.05)。2免疫组织化学SP法检测结果：IGF-Ⅰ表达在卵巢上皮性癌组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达率分别是77.4%、33.3%、0%(χ2=43.622,P<0.05),三组两两比较有统计学意义；在卵巢上皮性癌组织中,IGF-Ⅰ蛋白的阳性表达在临床分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期、有无淋巴结转移的组织中表达差异有统计学意义(P<0.05)；在不同年龄组、不同组织学分级及有无腹水的表达差异无统计学意义(P>0.05)。3免疫组织化学SP法检测结果：MMP-2表达在卵巢上皮性癌组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达率分别是71.4%、40.0%、0%(z2=33.962,P<0.05),三组两两比较差异有统计学意义；在卵巢上皮性癌组织中,MMP-2蛋白的阳性表达在临床分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期、有无淋巴结转移的组织中表达差异有统计学意义(P<0.05)；在不同年龄组、不同组织学分级及有无腹水的表达差异无统计学意义(P>0.05)。4卵巢上皮性癌组织中,HGF与IGF-Ⅰ蛋白的阳性表达水平呈正相关(r=0.860,P<0.05)；HGF与MMP-2蛋白的阳性表达水平呈正相关(r=0.947,P<0.05)；IGF-Ⅰ与MMP-2蛋白的阳性表达水平呈正相关(r=0.827,P<0.05)结论1 HGF、IGF-Ⅰ和MMP-2在卵巢上皮性肿瘤组织中呈高表达,提示可能共同参与卵巢上皮性肿瘤的发生发展；2 HGF、IGF-Ⅰ和MMP-2与肿瘤细胞的增殖、浸润和转移有关,可能对了解卵巢癌的侵袭和转移机制,肿瘤的临床治疗具有一定的意义。