论文部分内容阅读
目的：前列腺癌中已检测出多种异常表达的miRNAs充当抑癌基因或是癌基因。最近的数据显示miRNAs对肿瘤的增殖和转移起着非常重要的作用。我们的研究目的是为了研究抑癌基因has-miR-205在前列腺癌中的分子和功能机制。方法：我们通过对早期和晚期前列腺癌组织进行miRNAs表达的基因芯片分析，从中选出异常表达的miR-205进行实时定量PCR分析，并对其在前列腺癌中的功能进行分析，如细胞增殖，克隆形成，周期，凋亡，迁移，侵袭，肿瘤形成实验。此外，荧光素酶报告基因用于检测miR-205的靶基因，并用Westernblotting实验分析miR-205对靶基因c-SRC，p-c-SRC及其下游通路FAK,p-FAK,ERK1/2，p-ERK1/2蛋白表达情况。结果：通过对早期和晚期前列腺癌RNA的miRNAs基因芯片分析，miR-205在晚期前列腺癌中呈现低表达，通过对正常前列腺组织和病理证实的前列腺癌组织RNA的实时定量PCR分析，miR-205在前列腺癌中呈现低表达，并且miR-205的表达与临床病理分期和总PSA及游离PSA呈负关联。体外功能试验分析显示高表达miR-205或是敲除c-src基因的表达可以抑制前列腺癌细胞的增殖，克隆形成，迁移，侵袭，细胞周期和促进细胞凋亡。裸鼠体内实验分析高表达miR-205可以抑制前列腺癌肿瘤形成。通过荧光素酶报告基因和western bloting分析证实c-SRC是miR-205的靶基因，高表达的miR-205抑制c-SRC及下游通路FAK,p-FAK, ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达。结论：我们的结果证实抑癌基因miR-205在前列腺癌中低表达，并且通过靶基因c-src操控前列腺癌细胞的增殖和转移。结果预示着miR-205可能会作为前列腺癌潜在的治疗靶点。