本文包括五个章节。从发酵培养基,摇瓶培养条件,5L发酵罐培养条件三个方面对重组大肠杆菌DH5α生产rNGR-Tum-5的能力进行研究。使得在高密度培养情况下工程菌细胞终浓度OD₆₀₀达到16.0,rNGR-Tum-5表达量达到30%,rNGR-Tum-5的生产能力达到4.80。1.重组大肠杆菌DH5α发酵培养基的筛选在摇瓶中对大肠杆菌DH5α的发酵培养基进行研究,首先从几种常用的培养基中筛选出LB培养基作为基础培养基。在此基础上,对培养基中的碳源、氮源、微量元素进行筛选,得出在培养基组分（%）为:甘油1,酵母粉3,蛋白胨1,氯化钠0.5,微量元素母液0.15时,重组大肠杆菌DH5α生产rNGR-Tum-5的能力最强,较初始培养基提高了3倍。2.重组大肠杆菌DH5a摇瓶发酵的筛选在摇瓶中,研究发酵工艺条件如温度、溶氧量、种子菌龄、诱导时机、诱导剂浓度、诱导表达时间等对工程菌生长情况和蛋白表达的影响。得出最佳培养条件为:培养温度37℃,摇床转速200rpm,种子菌龄选择在OD₆₀₀为1.0,在对数生长中期(OD₆₀₀=2.0,4h处)时诱导,诱导剂浓度选择在0.5 mmol/L,诱导表达时间为4h。3.重组大肠杆菌DH5α在5L发酵罐中的培养根据工程菌高密度发酵的生长曲线,确定诱导时机。优选出合适的接种量8%,得出发酵罐中工程菌生长和蛋白表达情况。控制pH时采用二阶段培养法,前期菌体生长和后期蛋白表达维持在不同的pH范围;使工程菌生产rNGR-Tum-5的能力有所提高。对发酵产物进行分离纯化鉴定,在分子量约10⁴Da处出现一条蛋白带,为目标蛋白。