基于线粒体Cyt b基因序列的内蒙古苜蓿盲蝽遗传多样性研究

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苜蓿盲蝽(Adelphocoris lineolatus (Goeze))是古北界广布的一种十分重要的农业害虫,在20世纪50~60年代,曾对我国棉花的产量造成重大危害,因而一直受到昆虫学工作者的重视。昆虫学工作者长期以来为了更好的进行苜蓿盲蝽的防治工作,对苜蓿盲蝽的形态解剖及生物学等进行了较为深入的研究。在对苜蓿盲蝽的形态研究中发现不同个体之间,不同种群之间在体型的大小、体色、色斑等方面都存有差异。本研究用线粒体Cyt b基因作为分子标记,采用昆虫特异性引物通过PCR扩增和测序技术,共获得苜蓿盲蝽11个种群的Cyt b基因433bp的序列。运用分子生物学软件Clustalx1.8,DNAStar,DNAsp,Mega2.0对测序结果进行比较分析,探讨该保守区段的序列组成特点,以三种常见的建树方法:N-J法,ME法和MP法构建系统树,从分子水平探讨了苜蓿盲蝽遗传多样性的成因及其居群遗传结构和苜蓿盲蝽在居群内、居群间的分布规律,为苜蓿盲蝽的防治提供了基础理论依据,为进一步研究苜蓿盲蝽的遗传变异、进化潜力、对农药的抗性机制、有益基因的利用、有害基因的控制以及协同进化提供了有价值的基础材料。通过对实验结果的分析讨论,得出如下结论:1、对无水乙醇浸泡的标本和多年保存的干标本,应用SDS-蛋白酶K消化法均能提取出一定量的总DNA模板,并可以满足PCR扩增和测序的要求。但干标本DNA模板降解比较严重,未能得到特异性的扩增产物。2、通过对苜蓿盲蝽11个不同种群Cyt b基因的序列分析,在核苷酸和密码子的使用上表现出A、T偏向性(69.0%),密码子的第三位A、T偏向性更加明显(79.1%)。
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