局灶节段性肾小球硬化（focal segmental glomerulosclerosis, FSGS）是一种独立的肾脏病理诊断。光镜下主要表现为部分肾小球中毛细血管袢小叶的非炎症性硬化，电镜下主要表现为足突的广泛融合。家族遗传性FSGS（familial FSGS， FFSGS）是FSGS的一种主要类型，其主要表现为家族中一人肾穿证实为FSGS，同时伴有家族其他成员大量蛋白尿或不明原因的肾功能不全。关于其临床预后的研究，仅有少量文章报道了其临床表现重及预后不良。而对于与散发性FSGS（sporadic FSGS，SFSGS）相比，FFSGS临床表现及预后有何特征，目前尚没有大组数据的相关报道。FFSGS的发病机制目前广泛认为与足细胞相关蛋白的基因突变相关。目前已经发现了数种可以导致FFSGS的致病基因，但这些已经发现的致病基因仅能解释部分FFSGS的发病，尤其是在中国汉族人群乃至整个亚洲人群中，已知致病基因的突变率非常低。提示可能存在新的致病基因需要我们进一步去探索发现。基因的连锁分析及定位克隆在新致病基因探索中发挥了重要的作用，是目前寻找新致病基因的主要方法。INF2（inverted formin2）是2010年新近发现的可以导致常染色体显性遗传性FSGS的主要致病基因之一，在欧美人群中其基因突变率可高达12%-17%，而在中国汉族人群中其基因突变率如何，目前为止还没有相关的报道。此外INF2作为一种重要的成蛋白家族成员，其在维持细胞骨架方面存在重要的作用，但其作用机制目前仍不清楚。本研究第一部分收集了我科收治的FFSGS家系83个，患者合计共124名，以及同期所收治的性别年龄相匹配的SFSGS患者124名，通过对其临床资料的回顾性整理分析，观察FFSGS与SFSGS相比其临床特征如何。结果显示与SFSGS相比，FFSGS患者发病较早，少数患者表现为肾病综合征，多数患者可合并血尿，基线水平上患者肾功能及肾小球滤过率与SFSGS患者无显著性差异。病理表现上，FFSGS患者不论小球病变还是小管病变，与SFSGS患者相比其损伤均较严重。此外，FFSGS患者对治疗反应不良，与SFSGS患者相比预后较差。肾移植可能是FFSGS的有效治疗方法。本研究第二部分，通过对一个大FFSGS家系进行连锁分析，寻找其致病基因，连锁分析结果定位于14q32，为目前已知的AD FFSGS致病基因INF2所在位点，通过基因测序确定p.S85W为其致病基因突变。此外我们对所收集的70个FFSGS家系进行INF2基因突变的筛查，在另一个家系中发现另一新的致病基因突变p.S129_Q130ins VRQLS。由此在中国汉族人群首次筛查INF2基因突变率为2.8%，远低于国外报道的相关突变率，提示我们仍需要进一步探索针对中国人乃至亚洲人群的常见致病基因。本研究第三部分利用质粒转染的方法，研究p.S85W和p.S129_Q130ins VRQLS两个新发现的基因突变在足细胞损伤方面的作用机制。结果显示p.S85W质粒转染的足细胞INF2的蛋白表达水平较野生型质粒显著下调，免疫荧光结果显示野生型INF2呈颗粒状均质分布于细胞浆，而p.S85W突变型足细胞INF2呈团块状聚集于胞浆或核周。此外p.S85W突变型足细胞α-actinin4蛋白表达水平较野生型显著下降，其mRNA水平较野生型质粒同样显著性下降。血清反应因子（serum reactive factor，SRF）表达水平在野生型及突变型质粒没有显著性变化，而p-SRF水平较野生型质粒显著下降。Cdc42表达水平在突变型及野生型足细胞没有显著性差异。此外p.S85W突变型质粒还可改变足细胞骨架F-actin、α-actinin4的细胞内纤维状结构为弥散性颗粒状分布；野生型足细胞SRF主要分布于细胞核，少量分布于细胞浆，而p.S85W突变型足细胞则主要分布于胞浆，提示SRF转录活性的下降。免疫共沉淀结果显示正常足细胞及野生型足细胞INF2与Cdc42可相互结合，而p.S85W突变型足细胞两者的相互结合显著下降，与此相对应在激光共聚焦显微镜观察下，野生型及正常足细胞INF2与Cdc42分布于细胞浆，且两者呈现较好的共定位，而p.S85W突变型足细胞两者的共定位消失。以上结果在p.S129_Q130ins VRQLS突变型质粒中，与正常对照组及野生型足细胞均没有显著性的差别。而细胞黏附实验结果显示两种突变型质粒细胞黏附能力较野生型足细胞显著下降，而划痕实验结果显示两种基因突变型细胞迁移能力较野生型显著上升，提示生理状态下，基因突变型足细胞可能比较容易从基底膜脱落。此外Hoechst方法检测该两种新发现的基因突变可以加重足细胞的凋亡。综上所述，与SFSGS相比，FFSGS发病较早，主要表现为中等量蛋白尿，其病理表现较重，对治疗反应较差，预后不好，而肾移植是其有效的治疗方法。对所收集的FFSGS患者进行INF2基因突变筛查，发现p.S85W和p.S129_Q130ins VRQLS两种新的基因突变，中国汉族人群中INF2基因突变率仅2.8%，突变率显著低于欧美人群。在作用机制方面p.S85W可通过影响INF2与Cdc42之间的相互作用，降低SRF的活化，进而影响足细胞骨架蛋白的正常结构与功能，而p.S129_Q130ins VRQLS对以上改变无影响。此外两种基因突变均可降低足细胞的黏附能力，并促进足细胞凋亡。