EGFR在脊髓中的表达以及EGFR活化对小胶质细胞迁移的影响

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目的:本课题旨在研究EGFR在正常脊髓组织中的表达,脊髓损伤后小胶质细胞活化与EGFR通路激活的相关性,以及EGFR抑制剂(C225和AG1478)对小胶质细胞迁移的影响。方法:1.免疫荧光法观察正常脊髓组织多种细胞类型表达EGFR的情况;2.使用自由落体打击法建立脊髓损伤大鼠模型;3.免疫荧光法观察脊髓损伤后活化小胶质细胞中EGFR的活化;4.LPS诱导体外培养的小胶质细胞,建立炎症活化模型;Transwell法检测小胶质细胞的迁移,评估EGFR抑制剂对小胶质细胞迁移的影响。结果:1.在正常成年大鼠脊髓组织中,小胶质细胞和星形胶质细胞EGFR染色很弱,神经元细胞和血管内皮细胞EGFR染色明显。2.在脊髓损伤后,损伤周边区小胶质细胞内pEGFR的表达显著增高,尤其是在小胶质细胞胞膜,染色明显增强。3.与对照组(设为100%)相比,LPS诱导增强了细胞的迁移能力,6h内细胞迁移率为(165.3±0.3)%;4.C225和AG1478显著抑制了LPS诱导的迁移,其细胞迁移率低于LPS诱导组(p﹤0.01)。5.LPS对小胶质细胞没有趋化性;C225和AG1478对未活化细胞的迁移影响小,与对照组相比没有统计学差异(p>0.05)。结论:1.在正常成年大鼠脊髓,EGFR主要表达于神经元细胞和血管内皮细胞。2.脊髓损伤后,EGFR的磷酸化与小胶质细胞的活化相关;3.抑制EGFR活化可以减轻炎症诱导的小胶质细胞迁移,推测EGFR通路可以成为脊髓损伤治疗的靶点;4EGFR制剂C225和AG1478有望在脊髓损伤治疗中发挥重要作用。
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