目的创伤愈合是临床遭遇的最多的问题之一,其中病理性瘢痕形成,增生性瘢痕的预防与治疗一直是创伤修复的一个难题。伤口愈合的发生、发展及预后机制是十分复杂的生物学过程,受很多细胞因子影响。其中的关键因子环氧合酶(Cyclooxygenase, COX)有两种同工酶,其中环氧合酶2(COX-2)是前列腺素( Prostaglandins, PGs)生物合成的关键酶,在膜磷脂的代谢中起重要作用,是前列腺素合成中一个重要的限速酶。前期研究发现COX-2在血管生成、成纤维细胞迁移中起重要作用,提示病理性瘢痕形成可能与COX-2的表达有关。但现阶段国内外尚无对COX-2抑制剂与病理性瘢痕形成的相关研究。本研究拟通过体外及体内干预实验研究探讨COX-2信号通路对皮肤伤口炎症细胞、新生血管的影响,评价皮肤伤口愈合的情况,为减少伤口疤痕形成、促进愈合的诊疗方法提供实验依据。方法1、体外细胞实验:取正常人结缔组织成纤维细胞进行体外培养,并利用光学显微镜、相差显微镜等方法观察人成纤维细胞。2、采用体外成纤维细胞细胞培养划痕试验定性分析COX-2抑制剂的浓度与成纤维细胞迁移能力之间的关系。3、采用小鼠制作手术创口模型,然后运用COX-2选择性抑制剂尼美舒利对动物皮肤创口愈合过程进行干预。同时设有对照组及3种不同浓度的实验组。4、通过伤口新生血管观察、皮肤愈合后疤痕组织观察、皮肤铺片、创口免疫组化等方法对伤口生长过程中炎症细胞、新生血管、成纤维细胞的生长情况进行观察与评价;愈合伤口采用数字化分析来进行评价。并采用统计学方法分析评价结果。结果1、细胞培养实验显示COX-2抑制剂对成纤维细胞的迁移能力有明显影响,而且影响程度与COX-2抑制剂的药物浓度呈正相关,使用25μmol/L尼美舒利的实验组细胞成长效果较佳,细胞能均匀迁移到划痕中且没有出现排列混乱。2、体内实验表明:使用尼美舒利通过对COX-2信号通路进行调控对于皮肤伤口愈合有明显的影响,适当浓度的尼美舒利能够抑制伤口炎症反应,使成纤维细胞迁移控制在合适的程度。实验组与对照组在疤痕面积、增生性瘢痕发生率,疤痕色素沉着发生率等方面都有统计学差异。使用25μmol/L尼美舒利组获得了最佳愈合效果。3、创口免疫组织化学结果显示外用尼美舒利能显著抑制创口周围炎症细胞COX-2的表达水平,抑制程度与用药计量正相关。4、统计结果分析各实验组与空白组之间的创口愈合情况差异有统计学意义,大部分实验组之间的统计差异显著。结论1、外用选择性COX-2抑制剂尼美舒利可以对小鼠手术创口周围炎症细胞中的COX-2表达水平进行调控,COX-2的表达水平与应用药物浓度成负相关。2、COX-2抑制剂尼美舒利可以确切地控制手术创口新生血管的生长水平、成纤维细胞的迁移能力、炎症细胞的活性,在小鼠手术伤口愈合的发生、发展过程中合理地调控创口COX-2表达水平能有效地减少病理性瘢痕形成,值得进一步探讨其在创伤、美容、烧伤等方面的应用。