拟南芥碱性神经酰胺酶TOD1基因表达调控分析及植物神经酰胺酶筛选

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dldx05444011
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拟南芥TOD1(TurgOr regulation Defect 1)基因编码碱性神经酰胺酶,TOD1在花粉及角果的保卫细胞中特异性表达,参与调节花粉管的生长和角果表皮气孔运动过程中的膨压,该基因缺失突变体会因为花粉传递效率的降低而造成结实率下降,而在tod1 Δ4-desaturase双突变体中败育的表型能够得到部分恢复。鞘脂是真核生物膜组分中最主要的一种脂质,鞘脂的代谢异常会影响植物的发育以及对生物或非生物胁迫的适应能力,神经酰胺作为植物鞘脂代谢中重要的产物,对植物的生长发育有着重要的作用。本课题通过验证ABI3和ABI5这两个转录因子是否通过结合TOD1的启动子区域来调控TOD1的表达,进而深入了解鞘脂类物质代谢的分子调控机制,并在拟南芥TOD1基因家族中筛选编码植物神经酰胺酶(phytoceramidase)的候选基因,以便进一步研究鞘脂类物质调控植株生长发育的分子机制。凝胶迁移和染色质免疫共沉淀实验结果表明,ABI5可以和TOD1基因的启动子区域结合;real-time PCR实验结果显示,拟南芥TOD1家族成员中At1G28240在tod1 Δ4-desaturase双突变体花粉中表达量升高,可能编码植物神经酰胺酶;酶活实验结果表明,在碱性(pH9.4)条件下,At2G02910、At5G42660、At1G28240 和 At4G09630 均没有植物神经酰胺酶活性。
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