目的：线粒体是真核生物重要的细胞器，是细胞的能量代谢中心，被称为“动力工厂”。线粒体DNA（mitochondrial DNA, mtDNA）是目前发现的细胞核外唯一存在的遗传物质，它具有不依赖核基因独立完成复制、转录和翻译的功能。与核基因相比，mtDNA处于高氧环境中，其本身缺乏完整的损伤修复系统和组蛋白的保护，更容易受活性氧的损伤而引起突变。人类mtDNA是一长为16569bp的双链闭环DNA分子，由编码区和非编码区两部分组成，编码区共编码37个基因，包括13个蛋白质基因、2个rRNA和22个tRNA。D-Loop区是mtDNA的唯一非编码区，位于16024np-576np，约占全部mtDNA分子的6%。该区域包括重链复制起始点，轻、重链的转录启动子等重要结构，是mtDNA分子转录和复制的调控中心。目前研究表明，D-Loop区突变与人类肿瘤形成和发展之间密切相关，但关于mtDNAD-Loop区基因多态性与胃癌预后关系的报道甚少。本实验对mtDNA D-Loop区基因多态性与胃癌患者预后的相关性进行了研究，并分析患者临床特征和预后的关系，为胃癌患者合理治疗方案的制定及预后评估提供了理论依据。方法：1研究对象及随访：选取2007年1月~2007年12月于河北医科大学第四医院外三科行胃癌根治术的100例患者，术前均经内镜检查、组织病理确诊为胃癌。采集胃癌患者静脉血标本，并准确记录所有患者的性别、年龄、临床分期等临床特征。通过门诊复查、电话或信件对胃癌患者术后生存状况进行随访，随访截止时间为2011年1月。2mtDNA提取、扩增及测序：用DNA纯化试剂盒提取胃癌患者静脉血标本的mtDNA，DNA鉴定合格后，采用PCR技术扩增目的片段，上游引物为：5’-CCCCATGCTTACAAGCAAGT-3’，下游引物：5’-GCTTTGAGGAGGTAAGCTAC-3’。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳证实后进行测序，所用测序仪器为ABI测序仪（3730XL），同一标本采用双向重复测序。3统计分析：采用SPSS13.0统计软件对数据进行统计学分析，P＜0.05被认为有统计学意义。用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，用Log-Rank法分析单因素生存期的差异，用COX风险回归模型对多个预后影响因素进行分析，并计算P值、相对危险度（RR）、95%可信区间（CI）。结果：1对100例胃癌患者的mtDNA D-Loop区基因多态性进行单因素生存分析，结果显示16519T/C、150C/T、489T/C、515-524(AC)n4个位点与预后相关。16519位点T基因型与C基因型患者的3年生存率分别为55.3%和33.9%，T基因型患者的预后优于C基因型患者(P=0.037)；150位点C基因型与T基因型患者的3年生存率分别为38.7%和85.7%，T基因型患者的预后好于C基因型患者(P=0.037)；489位点T基因型与C基因型患者的3年生存率分别为56.3%和28.8%，T基因型患者的预后明显好于C基因型患者(P=0.002)；515-524位点(AC)5基因型与(AC)4基因型患者的3年生存率分别为32.1%和54.5%，(AC)5基因型患者的预后优于(AC)4基因型患者(P=0.045)。2对100例胃癌患者的临床特征进行单因素生存分析，结果显示性别（男性与女性，P=0.416）、年龄（≤60岁与＞60岁，P=0.271）、肿瘤位置（胃上1/3、中1/3与下1/3，P=0.080）、分化程度（高+中分化与低+未分化，P=0.841）及脉管瘤栓（无脉管瘤栓组与有脉管瘤栓组，P=0.178）与胃癌患者预后无明显相关性。Ⅰ+Ⅱ期患者和Ⅲ+Ⅳ期患者的3年生存率分别为78.1%、25.0%，Ⅰ+Ⅱ期患者预后明显好于Ⅲ+Ⅳ期患者(P=0.000)。肿瘤长径≤6cm与＞6cm患者的3年生存率分别为60.8%、22.4%，肿瘤长径≤6cm患者预后优于＞6cm患者(P=0.000)。3将单因素分析中差异有统计学意义组纳入COX模型多因素分析，结果显示，mtDNA16519位点T/C、489位点T/C基因多态性及临床分期、肿瘤长径是影响胃癌患者预后的独立因素（P﹤0.05）。16519位点C基因型患者的死亡风险是T基因型患者的1.923倍；489位点C基因型患者的死亡风险是T基因型患者的2.109倍；Ⅲ+Ⅳ期患者的死亡风险是Ⅰ+Ⅱ期患者的3.414倍；肿瘤长径＞6cm患者的死亡风险是≤6cm患者的2.065倍。结论：1mtDNA16519T/C、489T/C可作为胃癌患者预后的独立影响因素，两者T基因型患者的预后均优于C基因型患者。mtDNA基因多态性有望成为胃癌诊断的新分子标记物，更好的指导临床治疗。2胃癌患者的临床分期、肿瘤长径可作为其预后的独立影响因素，Ⅰ+Ⅱ期患者的预后明显优于Ⅲ+Ⅳ期患者，肿瘤长径≤6cm患者的预后优于＞6cm患者。