磷酸二酯酶(PDEs)通过催化cAMP和cGMP水解，调节细胞内第二信使的水平。磷酸二酯酶4特异地水解cAMP，主要存在于中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，T淋巴细胞，巨噬细胞等免疫和炎症细胞中。PDE抑制剂可用于治疗多种疾病，因此极具市场价值。PDE4选择性抑制剂可以用于治疗哮喘，慢性阻塞性肺疾病，抑郁，阿尔茨海默氏症、帕金森氏病等重大疾病。本论文中，克隆并用大肠杆菌和酵母菌表达人磷酸二酯酶4B2。所表达的蛋白将用于建立高通量筛选模型筛选其抑制剂。人白血病单核细胞中加入1ng／ml LPS于37℃孵育3小时后，提取总RNA。以总RNA为模扳，用RT-PCR的方法得到人PDE4B2编码区的基因片段。核苷酸序列分析表明扩增的片段与GenBank报道的序列相差三个碱基。通过定点突变得到了正确的编码序列。将cDNA分别插入表达载体PET-32a，pPIC9K和pYeDP60中，并在大肠杆菌和酵母菌中表达。筛选阳性转化子，诱导表达后得到重组蛋白。Western blot表明所表达的蛋白是重组人PDE482。纯化后，活性测定表明由大肠杆菌表达的蛋白具有类似天然蛋白的生物活性。