ADD3可变剪接在结肠癌与正常组织间差异表达的检测与分析

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lkstudybitcc2008
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目的检测ADD3及其剪接体在结直肠癌(CRC)组织、结直肠息肉组织以及人CRC细胞株SW480和SW620中的表达情况,分析ADD3及其剪接体与CRC的相关关系,探讨ADD3及其剪接体在CRC发生发展中的可能作用及其临床意义。方法建立T-ADD3、ADD3(-14)和ADD3(+14)Taqman实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)的方法。用此方法对收集来自本院2012年7月-2013年9月期间的50对CRC组织,20对结直肠息肉组织进行检测。用奥沙利铂和5-FU分别干预人CRC细胞株SW480(低侵袭性)和SW620(高侵袭性的),用建立的FQ-RT-PCR检测干预前后各样本中ADD3及剪接体的表达水平。结果用SPSS17.0统计软件进行分析。结果1.成功建立了T-ADD3、ADD3(-14)和ADD3(+14)Taqman FQ-RT-PCR的方法,扩增效率(95%-100%之间),重复性稳定(批间和批内CV<1%)。2.在CRC组织中T-ADD3与ADD3(-14)表达低于正常组织(P<0.001),ADD3(+14)/(-14)比值高于正常组织(P<0.001)。3.在结直肠息肉组织中T-ADD3、ADD3(-14)、ADD3(+14)较正常组织表达减少(P<0.01),ADD3(+14)/(-14)比值与正常组织相比无显著差异(P>0.05)。4.SW620中ADD3(-14)、ADD3(+14)较SW480表达减少(P<0.01, P<0.05),ADD3(+14)/(-14)比值高于SW480(P<0.001)。5.经奥沙利铂和5-FU分别处理两株细胞后发现SW620升高较SW480显著:SW480仅ADD3(+14)表达增加,SW620的ADD3(-14)、ADD3(+14)均有不同程度的升高,SW620的T-ADD3仅在奥沙利铂组升高显著。结论1.在CRC中存在一种以ADD3(-14)减少为主导致T-ADD3减少,伴随ADD3(+14)/(-14)比值升高的趋势。2.ADD3及其剪接体在息肉组织中表达减少,ADD3(+14)/(-14)比值未见明显改变。3.ADD3及其剪接体的改变可能跟CRC的侵袭能力有关。
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