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目的:1.探究CIK细胞的诱导过程对PD-1的影响,分析PD-1是否参与了CIK细胞的抗瘤过程。2.探究CIK生物治疗后再制备获得的CIK细胞其淋巴细胞亚群的变化,判断CIK治疗对肿瘤患者免疫细胞的影响。方法:1.筛选36例自愿接受CIK过继性免疫治疗且既往未接受过类似治疗的经病理确诊的恶性实体肿瘤患者作为肿瘤组。随机选择14名经体检未发现肿瘤及免疫性疾病的正常成年人作为健康对照组。2.在第1、第3周期CIK治疗前,经肘部静脉采集肿瘤患者外周血50-100ml并取样2ml用于检测,余外周血经诱导培养产生大量CIK细胞,取2mlCIK细胞用于检测,其余CIK细胞回输至患者体内。经肘部静脉采集正常成年人外周血2ml进行检测。3.利用流式细胞术检测并进行统计学分析,比较PD-1在诱导前后、CIK治疗前后的表达水平差异;分析CIK细胞中淋巴细胞亚群的表达水平在CIK治疗前后的差异;分析CIK治疗前后PD-1、CD3+CD56+、CD4+/CD8+的表达与治疗、分期的关系。结果:1.诱导后的CIK细胞其PD-1表达水平均比未经诱导的外周血高,经CIK治疗后CIK细胞中PD-1水平的升高更明显,差异有统计学意义,P<0.05。CIK治疗后的外周血中PD-1表达水平比治疗前的外周血低,同时收获的CIK细胞中PD-1表达水平比治疗前的CIK细胞高,但以上差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组外周血PD-1表达水平与肿瘤患者CIK治疗前的外周血PD-1水平相比无明显差异(P>0.05)。2.CIK治疗后获得的CIK细胞其CD3+CD56+表达水平比治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);而CD3+、CD4+表达水平以及淋巴细胞比例、CD4+/CD8+比值均较前升高,CD8+表达水平较前降低,差异均无统计学意义(P>0.05)。3.Ⅲ~IV期肿瘤患者PD-1以及CD4+/CD8+的初始表达水平均比Ⅰ~Ⅰ期患者低,CD3+CD56+的初始表达水平比Ⅰ~Ⅰ期患者高,以上差异均无统计学意义(P>0.05)。在CIK治疗后,PD-1的表达水平在III~IV期患者中升高、I~II期患者中降低,而CD3+CD56+、CD4+/CD8+的表达水平在所有患者中均升高。III~IV期患者外周血中PD-1、CIK细胞的CD3+CD56+的变化幅度小于I-II期患者,CIK细胞中PD-1、CD4+/CD8+的变化幅度大于I~II期患者,以上差异均无统计学意义(P>0.05)。4、在CIK治疗前后,PD-1、CD3+CD56+、CD4+/CD8+的表达差异与手术、化疗、放疗、分期均无明显相关性(P>0.05)。结论:1.CIK细胞的体外诱导培养过程可促进PD-1的表达。2.CIK治疗可抑制早期肿瘤患者体内PD-1的表达。3.CIK治疗可增强CD3+CD56+细胞的前体细胞在体外增殖的能力。