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近年来,我国各沿海城市时有发生食用圆尾鲎引起的食物中毒事故,严重威胁着人们的身体健康和生命安全。但引起食物中毒的圆尾鲎具体毒性成分尚未清楚,其各组织部位的毒性成分和毒性大小也尚未知晓,而且发生圆尾鲎中毒后缺乏相应应急处理检测方法。因此,实验中利用超高效液相色谱-串联质谱技术建立了河鲀毒素(TTX)及其同系物、亲脂性贝类毒素、亲水性贝类毒素的检测方法,对圆尾鲎样品进行检测分析,并结合柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测技术和小鼠生物实验进行结果验证,以明确圆尾鲎不同组织部位毒素的成分和含量差异。结果发现,圆尾鲎的组织毒力大小依次为肌肉>卵>结缔组织。圆尾鲎各组织部位均有检出河鲀毒素及其同系物,其中以河鲀毒素含量最高;亲脂性贝类毒素无检出;亲水性贝类毒素检出了dcGTX2和dcSTX,主要分布于肌肉和卵且含量较低。1确定了圆尾鲎中河鲀毒素及其同系物毒性成分及含量确定河鲀毒素及其同系物的色谱质谱分析条件,建立UPLC-MS/MS法检测圆尾鲎中河鲀毒素及其同系物的分析方法。样品采用3%乙酸/甲醇溶液对河鲀毒素及其同系物进行提取,MCX固相萃取柱净化,以Atlantis HILIC Silica色谱柱为分析色谱柱,以10mmoL/L甲酸-5mmoL/L甲酸铵缓冲液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,质谱采用多重反应监测模式(MRM)。结果显示,圆尾鲎的各组织部位均含有河鲀毒素及其同系物,以TTX为主,deoxyTTX次之。雌性圆尾鲎的组织毒性依次为肌肉>卵>结缔组织;雄性圆尾鲎的组织毒性为肌肉>结缔组织。其中在雌性圆尾鲎的肌肉、卵、结缔组织中的TTX最大检出含量为3.593μg/g、1.747μg/g、1.406μg/g,河鲀毒素及其同系物总毒素含量为3.977μg/g、1.978μg/g、1.511μg/g;在雄性圆尾鲎的肌肉和结缔组织中TTX最大检出含量为2.701μg/g、1.324μg/g,河鲀毒素及其同系物总毒素含量为3.344μg/g、1.598μg/g。2确定了圆尾鲎中亲水性贝类毒素毒性成分及含量确定亲水性贝类毒素的色谱质谱分析条件,建立UPLC-MS/MS法检测圆尾鲎中亲水性贝类毒素残留的分析方法。样品采用80%乙腈水(含0.1%的甲酸)溶液对亲水性贝类毒素进行提取,Sep-Pak C18固相萃取柱净化,以Atlantis HILIC Silica色谱柱为分析色谱柱,以0.5%甲酸乙腈和0.5%甲酸(含5mmoL/L甲酸铵)溶液为流动相进行梯度洗脱,质谱采用多重反应监测模式(MRM)。在文献方法的基础上进一步优化,建立圆尾鲎中STX、dcSTX和GTX2&3的柱前衍生高效液相色谱方法,对圆尾鲎样品进行检测。结果显示,亲水性贝类毒素UPLC-MS/MS法,dcGTX2和dcSTX有检出且含量均较低,主要分布在肌肉和卵中,雌性圆尾鲎样品的卵和肌肉中dcGTX2的含量分别为0.056~0.725μg/g和0.045~0.366μg/g,dcSTX的含量分别为0.030~0.069μg/g和0.012~0.062μg/g,卵的毒素含量大于肌肉;雄性圆尾鲎的肌肉中dcGTX2的含量分别为0.435μg/g和0.074μg/g,dcSTX的含量分别为0.010μg/g和0.039μg/g。柱前衍生高效液相色谱法,dcSTX有检出且主要分布在卵和肌肉中,雌性圆尾鲎的卵和肌肉中dcSTX的含量分别为0.022~0.063μg/g和0.018~0.057μg/g,卵的毒素含量大于肌肉;雄性圆尾鲎样品肌肉中dcSTX的含量为0.029μg/g,检测结果基本一致。3确定了圆尾鲎中亲脂性贝类毒素毒性成分及含量确定亲脂性贝类毒素的色谱质谱分析条件,建立UPLC-MS/MS法检测圆尾鲎中亲脂性贝类毒素残留的分析方法。样品采用甲醇对亲脂性贝类毒素进行提取,以ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱为分析色谱柱,以95%乙腈水(含20mmoL/L甲酸,2mmoL/L甲酸铵)和20mmoL/L甲酸-2mmoL/L甲酸铵缓冲液为流动相进行梯度洗脱,质谱采用多重反应监测模式(MRM)。10只圆尾鲎样品中均未检测到亲脂性贝类毒素。4通过小鼠生物方法验证了圆尾鲎毒性大小样品采用0.1%乙酸提取,取18~22g清洁级ICR小鼠腹腔注射毒素粗提液,记录小鼠的注射时间和死亡时间,计算样品毒力值。结果显示小鼠生物实验法测得雌性圆尾鲎各组织部位毒素含量大小依次为肌肉>卵>结缔组织,在肌肉、卵、结缔组织中的最大检出量(以河鲀毒素计)分别是16.96MU/g、8.77MU/g、6.70MU/g相当于3.731μg/g、1.929μg/g、1.474μg/g。雄性圆尾鲎各组织部位毒素含量大小为肌肉>结缔组织,在肌肉和结缔组织中的最大检出量(以河鲀毒素计)分别是14.18MU/g、7.00MU/g相当于3.120μg/g、1.540μg/g。