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水稻黄单胞菌水稻致病变种(以下简称Xoo)是一种能引起水稻白叶枯病的植物病原细菌。黄单胞菌属中已测序菌株的序列分析表明xrvA基因是高度保守的,其基因注释为黄单胞菌属毒力调节因子。Xoo13751菌株中xrvA基因编码产物XrvA蛋白含有一个H-NS结构域。H-NS蛋白是一类广泛存在于革兰氏阴性病原细菌中的模式调控蛋白,它们能与细菌的类核结合并在很大范围内调控原核生物的基因表达调控。
本实验室构建了xrvA基因的整合突变体菌株和xrvA过量表达菌株,初步表型检测发现该基因与Xoo毒力有关。本研究通过大量表型分析表明:xrvA基因整合突变后,显著降低了对宿主植株水稻的毒力;延迟在非宿主蓖麻引发HR反应;胞外多糖合成量、DSF因子产量与野生型菌株相比显著降低,胞内多聚糖原积聚量显著增加;然而,xrvA基因整合突变后对胞外酶合成、细胞游动性、生物膜形成和细胞表面吸附等细胞过程没有影响。Northern杂交分析表明,xrvA基因整合突变导致hrpG、hrpX、rpfC、,rpfF、rpfG和gumB等致病性相关基因在转录水平的表达量相比野生型显著降低。值得一提的是xrvA基因过量表达时,表型检测结果与xrvA整合突变体引起的表型类似,并且hrpX、rpfC、rpfF、rpfG和gumB等基因的表达量相比野生型亦显著降低。此外,我们构建了xrvA启动子-gusA的GUS报告质粒pGUSxrvA,GUS酶活检测和组织化学GUS染色结果表明,xrvA在基本培养基XOM2的表达显著提高,在宿主植株体内亦能显著表达。
此外,我们通过同源自杀质粒定点整合突变法构建了xrvA同源基因xrvB的突变体GXN2008。初步毒力检测结果表明:xrvB整合突变后,不影响其对宿主植株水稻特优63的毒力。
上述研究表明,xrvA是Xoo重要的致病力调控基因。