论文部分内容阅读
目的:探讨腹腔镜二氧化碳(CO2)气腹环境对人宫颈癌 Hela细胞生长的影响,及CO2气腹环境作用后Hela细胞对卡铂敏感性的影响。 方法:以人宫颈癌 Hela细胞株为研究对象,将人宫颈癌 Hela细胞置于含5%CO2、温度为37℃细胞培养箱内孵育,待细胞传代2~3代后,取处于对数生长期 Hela细胞,调整细胞密度为1.0×l06/m1,接种至细胞培养瓶内,放入细胞培养箱内静置培养24 h,使细胞贴壁生长。细胞分为4组:对照组、CO2组、卡铂组、CO2+卡铂组。对照组放入细胞培养箱内培养,连续72 h;卡铂组细胞培养24 h后换用含20 ug/ml卡铂的培养液,置于细胞培养箱内继续静置培养48 h;CO2组细胞置于医用无菌引流袋内封固,将医用无菌引流管与气腹机相连接,气腹机压力调至12 mmHg通入99.5%医用CO2气体,持续2 h,然后置于细胞培养箱内连续培养72 h;CO2+卡铂组在上述99.5%医用CO2气体处理后24 h换用含20 ug/m1卡铂的培养液,置于细胞培养箱内继续静置培养48 h。利用 CCK8法检测各组细胞的增殖活性;流式细胞仪PI染色分析各组细胞生长周期;及Annexin V-FITC检测细胞早期凋亡率。 结果:应用统计软件 SPSS13.0对所得数据进行分析,统计方法为析因设计方差分析和t检验,P<0.05为差异有显著性。结果表明:1 CO2+卡铂组与对照组比较,模拟CO2气腹环境后卡铂对Hela细胞生长仍有明显抑制作用。2 Hela细胞置于模拟CO2气腹环境后,与未经 CO2处理组细胞比较,CO2处理组Hela细胞增殖抑制率与早期凋亡率均明显下降,但细胞周期无明显差异。3加卡铂各组与不加卡铂各组细胞比较,卡铂处理组 Hela细胞增殖抑制率上升明显,并使肿瘤细胞停滞于 S期,G1、G2期细胞明显减少,凋亡指数明显增加。4 CO2+卡铂组与卡铂组比较,二者细胞增殖抑制率及早期细胞凋亡率均未见明显差异,前者 G0/G1期细胞减少,差异有统计学意义。 结论:1 CO2气腹环境能促进人宫颈癌Hela细胞生长,抑制细胞凋亡。2 CO2气腹环境作用后,Hela细胞对常用化疗药物卡铂的敏感性无明显变化。