银杏(Ginkgo Biloba L.)为现存古代孑遗植物,药用范围广泛,在中药应用中有悠久的历史。银杏叶主要活性成分为银杏黄酮和银杏内酯,银杏黄酮可抵抗自由基、抑制脂质过氧化、扩张血管、改善脑动脉,对老年痴呆、高血压、冠心病、动脉硬化、脑功能障碍等疾病有防治作用；银杏内酯是血小板活化因子拮抗剂,具有一定程度的抗炎和神经保护作用,在治疗哮喘、内毒素休克、器官移植排异、心脑血管疾病等方面有潜在的应用价值。银杏黄酮主要成分为槲皮素、异鼠李素和山奈酚,银杏内酯则主要包括银杏内酯A、B、C和白果内酯。这七种化合物不仅是银杏提取物中具有药理作用的活性成分,同时也是银杏叶制剂质量控制的重要指标,国内外银杏叶制剂的质量检测则以此七种成分为标准品检测黄酮和银杏内酯的含量。随着中药质量检测的日益完善以及银杏叶单一药用成分研究的日益增多,对这七种化合物单一纯品的需求越来越大。传统的分离纯化方法主要有溶剂萃取法和柱色谱法。但3种黄酮、4种内酯均为化学类似物,彼此的化学结构和极性很相似,单纯以溶剂萃取结晶,很难得到高纯度的内酯或黄酮单体；普通的柱色谱技术也不易分离得到质量分数大于95%的单品；而且传统的分离方法工艺复杂、纯化步骤多、样品损耗大、成本较高。高速逆流色谱(HSCCC)是近十几年发展起来的新型液-液分配技术,具有回收率高、进样量大、分离能力强、操作简便等优点,国内外已有将其应用于黄酮类和萜内酯分离与纯化的报道。3种黄酮成分中,异鼠李素和山奈酚化学结构和极性极为相似,很难分离。经一次高速逆流色谱,可将槲皮素与异鼠李素、山奈酚分开,但后两者不能分离；Fuquan Yang等利用多维高速逆流色谱分离异鼠李素和山奈酚取得了较好的效果,但需要两台高速逆流色谱仪串联使用,一般实验室难以做到。余佳红等利用高速逆流色谱以氯仿-甲醇-水为溶剂体系从银杏叶提取物中分离得到白果内酯单体,但未能分离其它三种内酯成分。本文则以银杏叶为原料,筛选了银杏叶粗取物的制备工艺,分别制备了较高纯度的总黄酮粗提物和总内酯粗提物；利用高速逆流色谱(HSCCC)从总黄酮粗提物中分离得到了槲皮素单体；首次尝试利用循环高速逆流色谱(循环HSCCC)在一台高速逆流色谱仪上将难以分离的异鼠李素和山奈酚分开,从总黄酮粗提物中高回收率地得到了异鼠李素和山奈酚单体；并利用高速逆流色谱从总内酯粗提物中分离得到了白果内酯和银杏内酯A、B、C四种内酯单体,其中银杏内酯A、B、C单体是首次利用高速逆流色谱技术获得；本文主要研究内容及结果如下：1.制备槲皮素单体：利用高效液相色谱(HPLC)测定了银杏叶中总黄酮含量为1.16%,其中槲皮素的含量为0.5%。银杏叶烘干粉碎,70%乙醇超声提取,氯仿萃取,D101大孔吸附树脂纯化,得总黄酮粗提物,总黄酮含量大于24%；利用HSCCC以正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水(5.5：4.5：5：5)为溶剂体系,从总黄酮粗提物中分离得到了槲皮素单体,最高纯度达98.6%2.制备异鼠李素和山奈酚单体：经上述HSCCC,可将槲皮素与异鼠李素和山奈酚分开,但后两者由于结构和极性极为相近,不能分离。在此基础上采用循环HSCCC法,即简单的利用一台高速逆流色谱仪将难以分离的异鼠李素和山奈酚的混合物作为样品,以正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水(5：5：5：5)为溶剂体系,进样后将检测器出口与输液泵入口相连接,再次将待分离部分泵入主机中进行分离,循环三次后,异鼠李素和山奈酚达到了很好的分离,得到两者的单体,最高纯度均在97%以上。3.制备白果内酯和银杏内酯A、B、C单体：银杏叶烘干粉碎,经25%乙醇热提取、醋酸乙酯萃取、D-101大孔吸附树脂柱和pH 4.0的Al2O3柱纯化,得总内酯粗提物,总内酯含量达44.98%。以总内酯粗提物为样品,以正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水(4：5：3：5)为溶剂体系,经HSCCC分离得到白果内酯和银杏内酯A、B单体,最高纯度分别达98.3%、98.9%和98.8%；利用上述溶剂体系,银杏内酯C和杂质不能很好分离,收集含银杏内酯C和杂质的馏分浓缩后作为样品,以正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水(2：6：3：5)为溶剂体系,再次经HSCCC分离得到银杏内酯C单体,最高纯度达98.4%。