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目的:通过对食管鳞状细胞癌及癌旁组织的检测确定长链非编码RNA CTA-250D10.23的表达差异,并探究其在食管鳞癌中的作用,为临床治疗提供新的治疗靶点。方法:1.搜集食管鳞状细胞癌与癌旁组织,并通过qRT-PCR检测LncRNA CTA-250D10.23的表达差异;并统计食管鳞状细胞癌患者的临床病理信息;采用qRT-PCR检测食管正常粘膜上皮细胞(Het-1A)及食管鳞癌细胞株(TE-1、TE-10、TE-11、KYSE140、KYSE150、EC109、EC9706)中检测长非编码RNA CTA-250D10.23的表达,筛选后续实验所需细胞。2.在高表达LncRNA CTA-250D10.23的KYSE150、TE-11细胞株中利用siRNA干扰技术敲低长非编码RNA的表达,利用cck-8法检测LncRNA CTA-250D10.23对食管鳞状细胞癌增殖的影响,利用划痕实验、Transwell小室实验检测长非RNA对食管鳞状细胞癌迁移的作用;并通过构建LncRNA CTA-250D10.23过表达质粒进一步验证其对食管鳞状细胞癌的功能作用。3.通过文献及生物信息学预测微小RNA has-miR-326与LncRNA CTA-250D10.23存在联系,将siRNA干扰LncRNA CTA-250D10.23的表达后,检测microRNA has-miR-326的表达;并探究microRNA has-miR-326对食管鳞状细胞癌生物学行为的影响。4.探究长非编码RNA CTA-250D10.23在食管鳞状细胞癌中的作用机制,利用生物信息学预测microRNA has-miR-326下游的靶基因,进一步qRT-PCR、western blotting技术检测下游靶基因的mRNA和蛋白的表达情况。5.采用Graph pad Prism6.0软件进行统计分析实验数据并作图,p值低于0.05则具有统计学意义。结果:1.长非编码RNA CTA-250D10.23在食管鳞状细胞癌组织及癌旁组织中差异表达,在癌组织中明显高于癌旁;统计分析食管鳞癌患者临床病理信息,发现长非编码RNA CTA-250D10.23的表达差异与食管鳞状细胞癌患者年龄、性别、肿瘤浸润深度、大小、分级、分期无明显关系;同时LncRNA CTA-250D10.23在食管鳞状细胞癌细胞中表达升高,其中KYSE150、TE-11细胞中表达差异最大,作为后续实验细胞。2.cck-8法检测结果显示干扰长非编码RNA CTA-250D10.23的表达后,可抑制细胞的增殖能力;划痕实验、Transwell小室实验提示干扰长非表达后,细胞的迁移能力被抑制;利用过表达质粒转染后结果提示KYSE150、TE-11细胞的增殖、迁移能力都得到了提升。3.长非编码RNA CTA-250D10.23可影响has-miR-326的表达;转染has-miR-326 inhibitor后可增加KYSE150细胞株增殖、迁移能力,而转染has-miR-326 mimic后细胞的增殖及迁移能力得到了抑制。4.通过生物信息学预测及文献查阅后找到has-miR-326下游靶基因,在转染miR-326 inhibitor后解除了microRNA对靶基因mRNA的抑制作用,同时转染miR-326 mimic可抑制靶基因的mRNA水平;在KYSE150细胞中长非编码RNA CTA-250D10.23表达,可抑制下游靶基因的表达,尤其是RARG的表达差异最明显;同时在蛋白水平上,转染miR-326 mimic后靶基因蛋白表达降低,inhibitor加入后表达表达明显增加,同时质粒过表达LncRNA CTA-250D10.23后RARG蛋白表达增加。结论:长链非编码RNA CTA-250D10.23可通过靶向抑制microhas-miR-326激活RARG的表达,从而促进食管鳞状细胞癌的增殖、迁移等生物学行为。