研究背景血栓闭塞性疾病是一种常见的疾病,与世界范围内的高发病率和死亡率有关。早期再通闭塞的血管,可以挽救缺血组织、改善患者的预后,是溶栓治疗的关键。目前有多种溶栓治疗的方法,包括静脉溶栓治疗和导管介入。然而,这些方法在临床上使用时有局限性,例如严格的排除标准、严重并发症、侵袭性。微泡已经被用作超声诊断的造影剂,后来被改进用于血栓的特异性分子成像。近年来,微泡在治疗领域,特别是在超声溶栓中的作用受到了越来越多的关注,因为微泡介导的超声空化效应不仅能有效地溶解血栓,而且无创、经济、方便,没有明显的禁忌症。许多研究都集中在微泡的耐受性和有效性上,但是完全性闭塞血管段前端血流阻滞仍然是一个主要的挑战,因为微泡难以通过全身注射到达血栓部位,这可能会阻碍微泡介导的超声溶栓在临床上的应用。有报道称,直接将微泡注射到闭塞血管的血栓部位中可以提高局部微泡的浓度,从而通过增强溶栓效应实现完全再通。然而,这种方法在临床应用时具有侵入性和不便利性的缺点,那么能否通过一种非侵入性的、简便操作的方法提高微泡在血栓附近的局部浓度呢?磁靶向治疗指的是在外部施加磁场下,通过控制磁响应剂的运动,从而促使相关药物到达所需的位置,进而达到增强药物治疗的效果。而磁性微泡介导的药物治疗目前也越来越受到关注,例如通过磁场应用,增加治疗性药物到达肿瘤部位,并在超声空化效应下,增强其治疗肿瘤的效果。而磁性药物溶栓上,相关研究已经证明了与溶栓药物相结合的磁性微米/纳米颗粒能在磁场作用下到达血栓部位,从而增强溶栓效果。在磁性微泡介导的超声溶栓上,目前相关研究相对少,并且这些研究针对的主要都是非堵塞性血栓的,在完全堵塞性血栓上,磁性微泡介导的溶栓目前并没有。在体内操作磁性微泡定向运动的研究上,我们实验室以前的研究已经确定了操纵磁性微泡的可行性,磁场下磁性微泡是能偏离主动脉轴流中心线,并到达主动脉壁的。此外,另一项研究证明了使用磁场引导磁性载体进入Y型分叉的特定闭塞分支内的可行性。相关研究也证明了偶联溶栓药物的磁性纳米颗粒能被引导到完全闭塞的血管段,并增强溶栓效应。磁性微泡能否被引导到完全堵塞血栓中,并且利用微泡介导的超声空化效应增强溶栓效果,这是值得进一步探讨的。研究方法和结果1.实验材料主要实验仪器:德国Siemens公司超声诊断仪(Sequoia512)。主要实验试剂:全氟丙烷脂质微泡造影剂(普通微泡),全氟丙烷脂质磁性微泡造影剂,尿激酶注射剂2.实验方案:(1)制备微泡并验证微泡的磁响应性及稳定性(2)磁铁导航下,超声联合微泡溶解3小时红白血栓的体外研究(3)磁铁导航下,超声联合微泡溶解12小时红白血栓的体外研究(4)超声联合微泡溶解大鼠左髂动脉红白血栓的体内研究及相关预后评价(5)超声联合磁性微泡治疗的安全性评价结果:(1)微泡磁响应性及稳定性实验证明了制备的磁性微泡磁响应性良好;普通微泡和磁性微泡稳定性上没有明显差异。(2)超声微泡体外溶栓US+M-MB组和US+M-MB+r-tPA组溶栓效果明显好于其他两组。在白血栓上,US+M-MB组和US+M-MB+r-tPA组溶栓效果没有显著差异;在红血栓上,US+M-MB+r-tPA组溶栓效果要优于US+M-MB组。在12小时龄血栓中,各组微泡溶栓效果都差于3小时龄血栓,但是US+M-MB组和US+M-MB+r-tPA组溶栓效果依旧好于其他两组。(3)超声微泡体内溶栓US+M-MB组和US+M-MB+r-tPA组溶栓效果明显好于其他两组。同时这两组治疗后的大鼠患肢组织血流灌注明显较其他两组提高。从组织凋亡情况及组织损伤指标上看,US+M-MB组和US+M-MB+r-tPA组也较其他两组明显改善。(4)磁泡和普通泡在超声处理下安全性评价磁导航下超声介导的磁泡治疗并没有明显的副作用。结论:(1)磁场导航下,磁性微泡相较于普通微泡,到达完全性堵塞血管段微泡数量明显增多;(2)磁场导航下,超声联合磁性微泡能明显增强完全堵塞血栓的溶栓效果;(3)磁场导航下,超声联合磁性微泡能改善溶栓后的组织血流灌注并减轻相关组织的损伤。