目的:(1)使用透射电子显微镜观察年老大鼠心脏Telcoytes(cardiac telocytes,CTs)的超微形态;(2)利用免疫荧光染色对CTs在年老心脏的分布进行研究并且观察心脏Telocytes随增龄的变化;(3)利用小RNA测序技术对缺氧条件下培养的心脏Telocytes分泌外泌体的micro RNA表达谱进行研究,利用IPA(Ingenuity Pathway Analysis)通路分析平台对可能生物与疾病功能、信号通路及调控网络进行分析。方法:(1)取年老SD雌性大鼠心脏进行透射电镜(TEM)包埋观察超微结构并对心脏心房心耳部分、中间部分和心尖部分的代表性切面进行拍照,使用Image J软件对各代表性切面的Telocytes的胞体面积、核面积、突起长度以及突起膨大直径进行测量;(2)取年老SD雌性大鼠心脏进行石蜡包埋连续切片,分别取心脏心房心耳部分、中间部分以及心尖部分的代表性切面进行c-Kit(CTs标记物)抗体免疫荧光染色结合CTs特征性形态结果,对CTs在代表性切面的细胞密度进行统计,并且与之前所做报道的心脏Telocytes在年青大鼠不同部分的分布情况进行比较来确定其密度和分布是否会随增龄发生变化;(3)利用c-Kit免疫磁珠分选技术分离得到的CTs于缺氧条件(5%O2,5%CO2,90%N2)下进行培养,收集上清液并且提取其分泌的外泌体(exosome),利用小RNA测序技术对外泌体的micro RNA表达谱做出研究并且使用IPA通路分析平台对可能生物与疾病功能、信号通路及调控网络进行分析。结果:(1)TEM结果显示年老心脏三个代表性切面在心肌间和微血管周边均有许多具有典型CTs形态特征的细胞,对各代表性切面CTs的胞体面积、核面积、突起长度以及突起膨大直径进行测量结果发现:心脏不同部位CTs的形态指标十分接近,差异没有统计学意义;(2)使用c-Kit抗体免疫荧光染色结合CTs特征性的形态结果,对CTs在代表性切面的细胞密度进行统计发现:年老大鼠心房心耳部分CTs细胞密度(47.65±4.01个/mm2)显著高于心尖部分(33.68±2.53个/mm2)和中间部分(26.49±2.11个/mm2),不同部位的差异有显著性统计学意义(p<0.05),且与我们前期报道的年青大鼠对应部位的CTs细胞密度相比,年老大鼠三个部位的CTs细胞密度均高于年青心脏[53],差异有显著性统计学意义(p<0.05);(3)对在缺氧条件下培养的CTs分泌的外泌体进行小RNA测序,可以得到12,690,873个原始Reads,经过滤获得10,878,946个确切Reads主要分布在30nt左右范围,与大鼠基因组匹配率为98.6%。将过滤所得Reads与mi RNA数据库mi RBase 20.0比对,确定159个成熟mi RNA,表达量超过100的有36个,其中表达量排名第一的为mi R-21-5p,表达量在10到100之间的有53个、其它的70个表达量低于10。经过IPA分析可知,在159个成熟已知的mi RNA中有20个mi RNA是与心脏病理相关的,使用mi RNA靶基因预测网站:Targent Scan Human,mi RDB,mi Randa,mi RWalk和IPA对这20个与心脏病理相关的mi RNA进行靶基因预测,预测到的靶基因一共是210个,将这210个基因导入IPA做核心分析揭示:CTs可能通过释放外泌体及其内含的mi RNA靶细胞的靶基因来调控一氧化氮在心血管系统中介导的信号通路、ERK/MAPK信号通路、CXCR4信号通路和TGF-β信号通路等,去调控心脏的生理病理。结论:(1)年老心脏不同部位CTs的形态及其胞体面积、核面积、突起长度、突起膨大直径十分接近;(2)年老大鼠心房心耳部分CTs细胞密度显著高于心尖部分和中间部分,而心尖部分的CTs密度也显著高于中间部分,年老心脏的CTs密度显著高于年青心脏;(3)缺氧条件下培养的心脏Telocytes分泌的外泌体中所含的159个mi RNA可能参与调控靶细胞的生长、增殖、分化、运动以及凋亡等过程,其中与心脏病理相关的有20个mi RNA,可能参与调控210个靶基因,受调控位列前5位的信号通路为:一氧化氮在心血管系统中介导的信号通路、ERK/MAPK信号通路、CXCR4信号通路以及TGF-β信号通路。