随着食品产业全球化,饮食习惯多样化,旅游行业国际化,经食物传播的肠道原虫疾病已备受人们关注。肠道原虫是生物体的一个多样化群体,有30多个门,但是导致人类食源性肠道疾病的属于顶复门原虫,根足亚纲,动鞭毛纲,微孢子虫门和纤毛亚门,其中一些可能会导致经济损失和严重疾病。隐孢子虫、环孢子虫、贾第虫和微孢子虫是较常见的肠道寄生性原虫,主要通过食物和水源传播,能够引起免疫正常人群的自限性腹泻,对于免疫功能低下人群可能引起迁延性致死性腹泻,尤其是HIV感染者。微孢子虫是一类专性细胞内寄生的单细胞真核生物,能够感染从无脊椎动物到人的几乎所有动物。自1985年微孢子虫发现于艾滋病病人以后,微孢子虫感染哺乳动物的报道越来越多。迄今已有至少8个属14个种可以感染人,其中毕氏肠微孢子虫是最常见的人兽共患虫种。免疫正常人群感染毕氏肠微孢子虫主要引起急性、自限性腹泻或隐性感染,免疫缺陷者主要表现为慢性、持续性腹泻,严重者可能危及生命。为了解河南省郑汴地区果蔬表面携带肠道原虫的情况,于2014年6-10月在郑州和开封两地的农贸市场及农田采集样品,共363份。参照Steele、Joan及孙芳芳等建立的方法对样品进行处理,包括洗脱、浓集和扩增。巢式PCR扩增毕氏肠微孢子虫的SSU rRNA基因中的内间隔转录区ITS和隐孢子虫、贾第虫及微孢子虫SSU rRNA基因中的多态区,检测到1份隐孢子虫阳性样本和26份微孢子虫阳性样本,携带率分别为0.3%和7.2%,未发现贾第虫和环孢子虫。调查了四大类果蔬样品包括嫩叶花苔类、根茎类、茄果类和瓜类均发现携带有寄生虫的情况,感染率分别为6.3%(17/268)、7.1%(3/42)、17.4%(4/23)和10.0%(3/30)。其中在西瓜上发现隐孢子虫和微孢子虫两种寄生性原虫。为了解河南省部分地区奶牛场毕氏肠微孢子虫的感染情况,评估其人兽共患的潜在性,本试验参照Buckholt设计的引物,巢式PCR扩增764份粪便样本,结果发现153份阳性样本,总感染率为20.0%。不同奶牛场郑州和中牟的感染率分别为16.3%(42/257)和21.9%(111/507),统计学差异不显著(χ~2=3.28,P≤0.07)。犊牛、育成牛、青年牛和成年牛的感染率分别为21.2%、24.1%、0和12.3%,统计学差异显著(χ~2=11.3,P≤0.01)。不同季节,冬季感染率最低9.4%,春、夏、秋三个季节的感染率分别为22.3%、27.2%和27.6%(χ~2=31.67,P≤0.0000000001)。经序列比对分析,153份样本共发现12种已知基因型(CM8、H、EbpA、EbpC、I、J、BEB4、BEB6、BEB8、COS-Ⅰ、CD6和D)和4种新基因型(分别命名为ZZ1、ZZ2、ZM1和ZM2),其中基因型J感染率最高达34.6%。基因型EbpC、I、J和BEB6在两个牛场均有发现,郑州某奶牛场基因型BEB6感染率最高23.8%,CD4感染率最低为2.4%,中牟某奶牛场基因型J感染率最高达40.5%,其次是基因型I 33.3%。为了解宁夏地区某奶牛场毕氏肠微孢子虫感染情况,对109份腹泻犊牛粪便样本进行PCR扩增,共发现51份阳性,感染率为46.8%,其中1月龄、2月龄和3月龄的感染率分别为41.5%、68.8%和46.4%,统计学无差异(χ~2=3.82,P≤0.28)。序列分析比对发现8种基因型,已报道的有5种包括基因型I、J、CM8、EbpA和O,还有3种新基因型分别命名为NX1、NX2和NX3,基因型J的感染率最高达49.0%,为优势基因型。本研究对我省郑汴地区果蔬表面携带的原虫情况进行了调查,并对河南及宁夏三个奶牛场毕氏肠微孢子虫的流行情况进行了调查,通过序列比对分析和种系发育分析,表明牛可作为人感染毕氏肠微孢子虫的储藏宿主,具有公共卫生学意义和人兽共患风险,为人微孢子虫病的防控提供了参考依据。