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目的体外培养获得细胞因子诱导的杀伤细胞,研究其表型与生物学活性,并探讨分析化疗联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)治疗III期胃癌术后患者的临床意义。方法利用Ficoll分离液从外周血中分离单个核淋巴细胞,通过IFN-γ、rhIL-2、rhIL-1α、anti-CD3McAb的诱导培养,获得大量CIK细胞。流式细胞分析法对CIK细胞进行动态表型分析;MTT法检测不同阶段CIK细胞的杀伤活性。对共88例III期胃癌根治术后行六周期化疗的患者回顾性分析研究,其中43例患者化疗结束后接受CIK治疗,45例单纯化疗。本组化疗方案包括含草酸铂与含多西紫杉醇两个方案,草酸铂方案共59例(单纯化疗组30例,CIK组29例),多西紫杉醇方案共29例(单纯化疗组15例,CIK组14例)。对CIK治疗前后T细胞亚群检测结果进行随访观察,并应用log-rank检验对两组总生存期与无病生存期进行比较。结果①CIK细胞体外显著扩增,培养第14天至21天期间形成高峰平台, CIK细胞对K562及Raji细胞的细胞毒活性在14天时达峰值,分别为(76.65±16.78)%与(75.32±15.61)%。②CIK治疗后两周时,CD3+细胞与CD4+/CD8+比值有明显升高,两个月时又恢复到接近治疗前水平,CIK治疗三周期后免疫功能维持在较高的水平。CIK联合化疗组与单纯化疗组的中位总生存期分别为41个月(95%CI:33.6-48.4月)与37个月(95%CI:27.9-40.1月),两组中位无病生存期27个月(95CI:23.1-32.9月)与22个月(95%CI:19.9-30.1月),两组总生存期(χ2=4.055, P=0.044)与无瘤生存期(χ2=4.480,P=0.034)比较差异均有统计学意义。结论培养至第14天CIK细胞增殖与杀伤活性均达到峰值,适合应用于治疗。采用CIK治疗III期胃癌患者可以促进化疗后免疫功能的恢复,延长无病生存期与总生存期。