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在分析HVT基因组US区序列的基础上，设计一对特异引物，从HVT Fc126毒株感染的CEF总DNA中扩增出长2014bp的HVT DNA非必需片段。将此片段克隆于pGEM—T easy vector上，获得了命名为pTus10的重组质粒。经序列测定表明，所扩增的2014bp片段与已发表的序列有极高的同源性。 从重组质粒pUR-MDVEgB上，分离出大小为1.8kb的MDV部分gB基因片段。将此片段插入到pEGFP—C1质粒多克隆位点区的相应位点之间，构建了命名为pGgB1的重组质粒。将该重组质粒进行改造，获得了部分gB基因片段与EGFP基因同处一个阅读框的命名为pGH-gB1的重组质粒。该重组质粒为构建转移质粒提供了带有筛选标记基因EGFP的基因表达盒元件。 从pGH-gB1上将3.8kb含EGFP与MDV部分gB基因片段的表达盒分离出来，然后应用平端连接反应将3.8kb的基因表达盒插入到HVT US10基因的Bgl Ⅱ单一酶切位点中，构建出含有EGFP基因和MDV部分gB基因片段表达盒的命名为pTuGH-gB1的HVT转移质粒载体。从该质粒上切掉MDV gB基因1.8Kb片段，回收7Kb大小的载体片段，然后进行自身粘连反应使之环化，构建出了含EGFP基因表达盒的命名为pTuGFP的又一HVT转移质粒载体。 利用转移质粒pTuGH gB1与pTuGFP，经转染和筛选分别获得了融合表达EGFP基因和MDV部分gB基因片段的重组火鸡疱疹病毒rHVT-gB1/EGFP以及单独表达EGFP基因的rHVT-EGFP。在构建试验中，比较了磷酸钙法和脂质体法的转染效果，对脂质体法的转染条件作了比较优化，对转染后有绿色荧光的细胞分别应用有限稀释法和“金属环套斑法”作了筛选。结果证明，磷酸钙法转染不适合本试验，而用Kit法提取质粒、脂质体用量为25ul、细胞接毒量为0.5ml和细胞接毒吸附2小时后培养8小时是脂质体法的最佳转染条件；有限稀释法不适合本试验中重组病毒的筛选，而用“金属环套斑法”则筛选到了初步纯化的表达绿色荧光蛋白的两种重组HVT。 以上两种重组HVT的获得，使得进一步研究它们的生物学特征、预测它们的应用前景及构建更多的表达外源基因的重组HVT变得实际可行。