骨关节炎软骨细胞中血管内皮生长因子和缺氧诱导因子1α的表达及外源性透明质酸钠作用的实验研究

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sisu16113
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目的 比较研究两种家兔骨关节炎动物模型软骨退变进程中血管原性细胞因子血管内皮生长因子(VEGF,vascular endothelial growth factors)及核转录因子缺氧诱导因子(HIF-1α,hypoxia-inducible factor 1,alpha subunit)在软骨中的表达变化,以及关节注射透明质酸钠对骨关节炎(OA,osteoarthritis)进程、VEGF及HIF-1α在软骨中的表达的影响,探寻VEGF、HIF—1α和骨关节炎进程的关系以及关节注射透明质酸钠对软骨的保护作用和对OA的治疗机制。 方法 大耳白兔50只,月龄7~8月,体重2.8~4.5kg,雌雄不限,随机分为A、B、C、D、E共5组,每组10只,每组再根据取材时间分成4周和8周组。A组行单侧膝关节行Hulth法造模,手术行膝关节内侧副韧带、前后交叉韧带切断和内侧半月板切除制作OA模型;B组为单侧膝关节行Hulth法造模加关节注射透明质酸钠0.3ml/周,直至动物标本取材;C组为单侧膝关节伸膝位管型石膏固定,D组为单侧膝关节伸膝位管型石膏固定加石膏开窗、关节注射透明质酸钠0.3ml/周,直至动物标本取材;E组右侧膝关节作正常对照。造模4周和8周后分批用空气栓塞法在A~D组干预膝侧和E组右膝股骨内髁软骨取材。标本经固定、脱钙、包埋、制片后,进行苏木素伊红染色、Safranin O—Fast Green染色和免疫组织化学检测软骨细胞中VEGF和HIF—1α的表达。观察方法包括大体观察、光镜组织学观察、VEGF和HIF1-α免疫组织化学观察。两名独立的观察者采用盲法分别对各样本进行Mankin评分和全层软骨细胞中VEGF、HIF-1α免疫组化阳性细胞计数(细胞分数)。分析两种模型OA软骨病变的特点、不同骨关节炎阶段病损关节软骨中VEGF、HIF1-α在软骨细胞表达变化、外源性透明质酸钠对两种OA模型Mankin评分、软骨细胞表达VEGF和HIF1-α的影响。数据的录入和分析采用SPSS12.0
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