【摘 要】
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APOBEC3蛋白家族是一类重要的慢病毒复制的免疫限制因子。慢病毒编码的辅助蛋白Vif可以与Cullin5-Elongin B-Elongin C形成E3泛素化连接酶复合物使APOBEC3G(A3G)聚泛素化和降
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APOBEC3蛋白家族是一类重要的慢病毒复制的免疫限制因子。慢病毒编码的辅助蛋白Vif可以与Cullin5-Elongin B-Elongin C形成E3泛素化连接酶复合物使APOBEC3G(A3G)聚泛素化和降解,从而抑制A3G对病毒的限制。CBF-β为RUNX家族转录辅助因子,可以调节Vif介导的A3G降解作用。为探索CBF-β对非洲绿猴猴免疫缺陷病毒Vif蛋白(SIVagm Vif)的调节机制以及对A3G降解的影响,本研究通过生化及病毒学方法对SIVagm和HIV-1编码的Vif蛋白与CBF-β作用进行了对比性研究。 结果显示,SIVagm编码的Vif对相应物种A3Gagm的降解同样需要CBF-β的辅助。在生化功能实验当中,CBF-β辅助SIVagm Vif蛋白介导的A3Gagm降解机制与HIV-1 Vif蛋白具有一定的相似性,同样通过CBF-β促进SIVagm Vif蛋白在细胞内的稳定性及打破SIVagm Vif蛋白在细胞内的寡聚化聚集状态,使SIVagm Vif更有效的降解相应物种的A3Gagm。由此推测,CBF-β辅助Vif介导的降解A3G的作用在灵长类慢病毒中具有保守性。 当Vif(HIV-1/SIVagm)缺失N端12个氨基酸后,CBF-β辅助Vif蛋白调节A3G降解的能力显著降低。研究Vif蛋白缺失体的生化功能实验结果显示,Vif缺失体失去了与CBF-β的相互作用,CBF-β不能促进Vif缺失体在细胞内的稳定性,Vif在细胞内仍然主要以高聚体形式存在。由此表明,慢病毒编码的Vif蛋白N端12个氨基酸对与CBF-β的相互作用具有重要作用。
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