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目的:未成熟树突状细胞(immature dendritic cells, imDCs)诱导免疫耐受的作用越来越受到重视,如何保持其未成熟状态成为研究热点。本文旨在研究曲古霉素A(Trichostatin A,TSA)对小鼠骨髓源性树突状细胞表型和功能的影响。方法:取小鼠骨髓前体细胞,在含重组小鼠粒/巨细胞刺激因子(recombinant mousegranulocyte-macrophage colony-stimulating factor, rmGM-CSF)和重组小鼠白介素-4(recombinant mouse interleukin4,rmIL-4)完全培养基中诱导其向DCs分化,于第6天收集疏松贴壁细胞分为4组:空白组(不添加任何药物)、TSA组(加入100ng/mlTSA)、LPS组(加入100ng/ml LPS)、LPS+TSA组(分别加入上述药物),继续培养48h后收集细胞。倒置显微镜观察不同时间段细胞形态学变化。收集上述4组诱导培养至第8天疏松半贴壁细胞,PBS洗涤后调整细胞浓度5×106/ml,取100ul悬液加入流式试管中,加入FITC标记CD86、CD80单克隆抗体各0.5ug,同型对照组分别加入相应的同型对照抗体,4℃静置避光30min,PBS再次洗涤后上流式细胞仪测定各组DCs表面CD86、CD80的表达情况。混合淋巴细胞增殖实验检测(MTT法)4组诱导培养至第8天的DCs对异基因T淋巴细胞增殖能力的影响。ELISA检测各组培养至第8天的细胞上清液IL-12、IL-10分泌的变化。结果:倒置显微镜观察,刚开始前体细胞体积较小,呈圆形贴壁生长。随着培养时间的延长,胞体增大,变成椭圆形或不规则,至第2天有少量DCs集落生成,第4天DCs集落增多、增大,继续培养至第6天见DCs集落呈疏松贴壁悬浮状态生长,集落周围有树突样悬浮细胞出现,呈典型DCs形态;流式细胞仪结果显示经TSA处理后,DCs表面分子CD86、CD80表达均低于其它各组(P<0.05),尤其较LPS组降低更明显;混合淋巴增殖实验显示TSA诱导的DCs显著降低同种异基因T淋巴细胞增殖能力,提示DCs抗原提呈能力受损;ELISA检测结果表明TSA能显著提高树突状细胞分泌Th2型细胞因子IL-10(P<0.05),与此同时对Th1型细胞因子IL-12分泌量抑制显著(P<0.05)。结论:TSA能够抑制树突状细胞的成熟和诱导未成熟树突状细胞的产生。该DCs不能被促炎因子激活,稳定保持耐受性表型特征,因此其诱导的DCs在今后炎症性疾病和器官移植排斥反应等方面具有广泛应用前景。