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大叶蒟素(laetispicine)为本课题组通过活性筛选从胡椒科(Piperaceae)胡椒属(Piper L.)植物大叶蒟(Piper laetispicum C.DC)中提取分离得到的具有新骨架的新化合物,药理实验证明大叶蒟素具有显著的抗抑郁活性,同时也有较好的镇痛和抗焦虑作用。大叶蒟素抗抑郁作用机制方面本课题组前期研究发现其与普通抗抑郁药并不相同,有可能成为一种新型的抗抑郁药。本文对大叶蒟素的体内外药代动力学方面进行了比较全面的研究,并对其抗抑郁作用机制进行了探讨。第一部分大叶蒟素药代动力学研究考察大鼠灌胃给药10 mg/kg、20 mg/k、50mg/kg,尾静脉注射2.5 mg/kg给药后的大叶蒟素药动学和20 mg/kg灌胃给药后大鼠组织分布情况,计算药动学参数及生物利用度。以Caco-2细胞模型评价大叶蒟素的细胞转运特点,对大叶蒟素的溶解性、pH值、温度、浓度及P-gp蛋白对大叶蒟素Caco-2细胞转运的影响进行评价,从而推测大叶蒟素在小肠吸收的情况。利用体外肝微粒体孵育体系推测大叶蒟素在肝内的代谢,以大鼠灌胃给药后尿液粪便中代谢产物的检测进一步推测大叶蒟素在大鼠体内的代谢情况。结果：大叶蒟素在大鼠体内血药浓度达峰时间为3h,半衰期为7.82±1.58h,生物利用度23.12±4.96%,其在主要分布在胃、肝、小肠等组织,脑内药物与血浆内药物浓度比值0.949。大叶蒟素表观渗透系数为(5.6±1.04)×10-6cm/sec,属于难吸收药物,低温和高药物浓度可以抑制大叶蒟素在Caco-2细胞的转运,加入P-gp蛋白抑制剂后药物吸收分泌都有所增加,大叶蒟素在Caco-2细胞吸收分泌均可以被低温抑制,推测有载体介导了大叶蒟素在Caco-2细胞的转运,该载体无方向性且与P-gp蛋白可能有相互作用。通过体内外代谢结果推测大叶蒟素在肝内被CYP2C9代谢成代谢产物M。结论：大叶蒟素可以比较容易的跨血脑屏障,其比较低的生物利用度可能与吸收差有重要关系。第二部分大叶蒟素抗抑郁作用机制初步研究通过强迫游泳试验对大叶药素31个同系物进行了抗抑郁活性筛选,并探讨了大叶药素抗抑郁活性的构效关系。利用MTT试验、LDH试验、RT-PCR方法、Western blot方法,考察大叶药素保护谷氨酸损伤PC12细胞情况,并对其抗PC12凋亡机制进行了探讨。结果：大叶药素结构碳链上孤立双键、共轭双键、右侧异丁基为活性必须基团,苯环取代基与活性相关,但五元环氧环为非必须结构。谷氨酸20mmol/L损伤PC12细胞的同时加入大叶药素均可以提高细胞的存活率,尤其是在0.5μmol/L时效果显著(P<0.05),而且可以显著抑制损伤PC12细胞乳酸脱氢酶的释放,大叶药素可以显著提高损伤细胞的Bcl-2蛋白表达量,对Bad蛋白的表达量也有一定的抑制。结论：大叶药素具有保护谷氨酸损伤PC12细胞的作用,通过调控细胞凋亡相关蛋白的表达抑制凋亡可能是其作用机制。本文对大叶药素体内外药物代谢动力学情况进行了研究,获得了大叶药素的吸收、分布、代谢、排泄的相关数据。从构效关系和保护谷氨酸损伤PC12细胞角度对大叶药素抗抑郁作用机制进行了初步研究。以上结果为大叶药素新药开发及临床应用提供了重要依据。