姜黄素涂膜剂研制及促进动物手术创口愈合疗效观察

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创伤是动物体表的病理性损伤,有外伤、烧伤、疖、疮、痘、溃疡等多种表现。创伤的愈合对动物生理机能的恢复有着积极的意义。创伤愈合是涉及细胞的炎性反应、组织修复及细胞因子分泌与调控的复杂过程,许多中药及其成分都可影响到这一过程,如具有生肌、祛瘀、抗菌消炎等种类的中药都有促进伤口愈合的功效。同时,不同的制剂剂型对动物伤口愈合质量非常重要,尤其是外用剂型非常适合表面术后创伤的愈合治疗。这些剂型主要有膏剂、散剂、凝胶剂、巴布剂、膜剂及涂膜剂等,但涂膜剂尤其适合动物的创伤愈合治疗。涂膜剂是由主药、促透剂、成膜材料及基质通过筛选制成,使用后可短时自行成膜,并不断向创伤部位释放药物,具有长效及不需外加敷料等优点。但一个好的涂膜剂需要解决主药的溶解,促透剂筛选、基质组合及稳定有效等关键问题。姜黄素是一种具有抗菌消炎及对术后伤口消炎具有较好疗效的中药提取物,但使用剂型多为膏剂、片剂、散剂、微乳,尚无涂膜剂研制的报道。本研究拟筛选能够有效促进姜黄素透皮的促透剂,确定主药、促透剂及基质最合适的比例及制备方法,开展对皮肤刺激性及稳定性试验,评价该制剂抗菌消炎、促进术后创口愈合的效果,测定透皮给药后姜黄素的吸收分布特点,为制备疗效可靠、安全稳定的姜黄素涂膜剂提供依据。试验Ⅰ薄荷醇和PEG-400对姜黄素体外透皮效果观察通过比较不同浓度的薄荷醇和不同浓度的PEG-400对促伤口愈合药物姜黄素在小鼠皮肤的体外透皮效果,筛选出最好的促透剂及其浓度。采用智能透皮试验仪,选取小鼠皮肤,研究不同浓度薄荷醇和PEG-400单独以及联合使用时对姜黄素的透皮吸收的量效关系,计算出12h内的累积透过量和渗透系数。结果显示单独使用时PEG-400促进姜黄素透皮的累积量及其渗透系数较高,其中6%的PEG-400促进姜黄素透皮的累积量及其渗透系数最高,显著高于其他各组,表明其促透效果最好;而薄荷醇和PEG-400联合使用时,4%的薄荷醇和6%的PEG-400共同促进姜黄素的透皮吸收时,累积透过量及其渗透系统最高,极显著高于其他各组,据此确定了姜黄素的最佳促透方案。试验Ⅱ姜黄素涂膜剂的制备工艺研究在筛选到薄荷醇作为姜黄素促透剂的基础上,通过正交试验筛选成膜材料,并优化姜黄素涂膜剂的组分。以聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVPK-30)、乙基纤维素(EC)和聚乙二醇-400(PEG-400)为成膜材料制成涂膜剂,设计正交试验综合评价该涂膜剂的膜性及成膜外观。结果显示该涂膜剂成膜材料的最佳配比为:PVPK-30 2g,EC 1g,PEG-400 6ml,据此确定了该涂膜剂的最佳组合。同时制备姜黄素涂膜剂,并对涂膜剂的刺激性、稳定性等指标进行质量检验,结果表明,制成的姜黄素涂膜剂对皮肤无刺激性、稳定,符合涂膜剂的质量要求。试验Ⅲ姜黄素涂膜剂促进动物手术创口愈合效果观察目的探讨姜黄素涂膜剂的抗菌消炎及促进动物伤口愈合作用。方法以动物伤口常见的金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等四种细菌为指示菌,采用平板法做抑菌试验,评价不同浓度的姜黄素溶液抑制四种伤口常见感染细菌的抑菌作用。以小白鼠耳廓肿胀试验评价姜黄素涂膜剂对二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症的抗炎效果;在新西兰大白兔皮肤分别建立线形及圆形伤口模型,并在伤口模型上用药,分别用致创不用药组、阿米卡星治疗组和涂膜剂治疗组进行对照。对线形伤口分别于1、3、5、7和10d对伤口进行肉眼观察,评价创口愈合效果;对圆形创口,分别于1、3、5、7、10d和14d对伤口进行肉眼观察,并取第7d、第14d伤口周围皮肤做组织切片进行病理学观察。结果姜黄素对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等四种菌均具有抑菌作用,且对犬金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好。小鼠的耳廓肿胀试验表明姜黄素具有一定的抗炎作用。姜黄素涂膜剂对兔人造伤口愈合试验结果,无论是线形创口还是圆形创口涂膜剂治疗组伤口愈合效果均明显好于其他各组,病理切片观察表明,涂膜剂治疗组表皮已愈合完好,有角质层,胶原纤维束较紧密,毛细血管较对照组为多,成纤维细胞大体数量少于对照组;阿米卡星治疗组上皮细胞缺损,胶原纤维束排列不自然,成纤维细胞大体数量多于涂膜剂治疗组;而致创不用药组有大量成纤维细胞分泌,胶原纤维束疏松、间隙大,排列不均匀。试验Ⅳ姜黄素涂膜剂中姜黄素在动物体内的药动学测定 研究姜黄素涂膜剂中姜黄素在大鼠体内的代谢动力学。将试验大鼠给予涂膜剂后,用高效液相色谱测定24h姜黄素在大鼠体内的血药浓度,并用winnonlin 6.2.0非房室模型分析药动学参数。结果表明,大鼠血药浓度的峰值Cmax为555ng/mL,达峰时间Tmax为12.4h,血浆中药物消除半衰期t1/2 =40h,血药浓度的峰值Cmax为528.00ng/mL,达峰时间Tmax为4h,血浆中药物消除半衰期t1/2=19.63h,试验结果表明,涂膜剂中姜黄素能够透过皮肤进入血液,并维持一定的血药浓度。
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