双层骨—髌腱—骨重建前交叉韧带术后的两种康复方案下移植物组织学及生物力学的相关研究

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目的:前交叉韧带(Anterior Cruciate Ligament,ACL)重建手术治疗ACL损伤目前已趋于成熟,术后的效果主要是以术后的功能恢复与肢体稳定性作为评价标准。手术的方式,移植物及其固定方法选择固然重要,但术后的功能锻炼也是必不可少的,只有两者共同参与下,才能达到良好的术后效果,使患者恢复理想的膝关节功能。目前ACL重建手术的方式、移植物及固定方法均有大量的相关研究和较为统一的选择标准,但同样非常重要的康复方案的制定,尚缺乏相关的科学依据做指导。并且就目前现有的康复方案选择上也存在不同的观点。本实验通过对兔前交叉韧带人为切除后,采用同种异体双层骨-膑腱-骨(double-layer bone-patellartendon-bone allograft)移植物材料重建前交叉韧带,术后随机分组分别采用相对较保守的康复方案和激进的康复方案进行康复治疗,并在各个时间点下观察两组不同康复方案治疗后的前交叉韧带解剖大体观、组织学切片,记录其生物力学数据等客观证据,从而分析并探讨两种康复方案的优缺点,对比两种方案的可行性,从而加强对临床工作中前交叉韧带重建后康复方法的进一步认识,为临床康复工作提供参考。  方法:  1使用9只成年新西兰大白兔作为移植物供体,应用无菌取材方法切取双侧后肢骨-膑腱-骨移植物,并制备成双层骨-膑腱-骨移植物,测量其几何学特性。  236只成年新西兰大白兔,随机选取其一侧后腿切除膝关节前交叉韧带,使用制备好的同种异体兔双层骨-膑腱-骨移植物进行前交叉韧带重建手术。术中严格无菌操作,术后给予抗感染等治疗。术后随机分为相对较保守组(简称A组)、激进组(简称B两组),A组采用经由传统的保守康复方案加以改进后的较保守的康复方案:①术后6周以内制动,从腹股沟到趾头使用U型石膏固定患肢于180°位,踝关节背屈60°,用绷带缠紧。②6周后拆除石膏,并于每天早、中、晚3次,每次1小时轻柔弯曲膝关节,被动活动3天后让其自主活动。;B组采用激进的康复方案:术后即下地自由活动,术后第一周屈膝60°,第二周90°,第三周120°。  3 A、B两组分别于术后第3周、6周、12周时,两组分别随机抽取6只观察记录其术后患肢活动情况,全部采用耳缘静脉空气栓塞法处死,切取动物的术后关节标本(包括股骨端与胫骨端)。其中1个标本用于观察移植物大体解剖观(前交叉韧带宽度);3个标本用于测量股骨-移植物-胫骨生物力学特性:去除附着的膝关节周围软组织,仅保留移植的前交叉韧带,使用生物力学测试机进行拉脱试验,使用软件计算最大载荷,最大位移,最大载荷能量;剩余2个标本经固定、脱钙、取腱骨界面切面、染色制备组织学切片。  结果:ACL重建术后即刻检查lachnman试验,36只兔均为阴性,两组实验对象均生长状况良好。  1解剖大体观:3周、6周时两组移植物无明显差异,12周、24周时较保守组比激进组移植物较粗,差异不明显。  2生物力学结果:3周、6周、12周时两组分别进行拉脱试验,随着时间增长,拉力也在逐渐增加。3周时A组(5.6±0.9)N与B组(5.8±1.2)N,差异不明显;6周时A组(14.9±2.3)N与B组(10.3±1.9)N差异较明显;到12周时两组的数据对比最明显:A组在(42.6±3.7)N拉力下被拉出(其中2个韧带标本中间实质部被拉断);B组拉力达到(34.2±2.6)N时韧带从隧道内被拉出。  3组织学切片观察:3周时两组均有腱骨界面重构和血管再生,在骨道壁上伴有大量成骨细胞,软骨样和成纤维细胞增生,可见少量新生骨。6周时显微血管界面组织密集,排列有序,软骨样细胞从骨向肌腱生长,肌腱周围新骨形成,骨道壁增厚。12周时,腱骨愈合更为牢固。  结论:双层骨-膑腱-骨移植物重建前交叉韧带术后较保守组无论从韧带解剖观、生物力学、组织学上,均优于激进组。虽然早期积极的康复锻炼能够改善膝关节功能,但根据观察组织学切片,发现腱骨愈合界面的强度6周左右时较为牢固,此时功能锻炼较为合适,相比较激进组的早期锻炼更为合理。其远期效果有待研究。
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