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背景和目的:结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是常见的恶性肿瘤之一,大肠癌在中国的发病率近来有上升的趋势,在恶性肿瘤中已排在第四位,占西方国家癌症发病率的第二位,在男女性恶性肿瘤死因中都居于前列,复发转移是患者死亡的主要原因,发病机制尚不完全清楚。很多研究者认为肿瘤组织中存在少部分肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC),CSC和胚胎干细胞(embroynic stem cells,ESC)一样具有自我更新,无限增殖,多向分化的潜能,是恶性肿瘤的起始细胞并维持肿瘤的生长,少数处于休眠状态的肿瘤干细胞对放、化疗不敏感,成为肿瘤复发转移的根源。随着肿瘤干细胞概念的提出,胚胎干细胞因子Oct-4、Sox-2等近年来在恶性肿瘤领域成为研究热点。已有研究提出结直肠癌中存在肿瘤干细胞,这是结直肠癌发生及复发转移的根源。Oct-4(Octamer binding factor 4)是一个在全能性细胞或胚胎干细胞中特异性表达的转录因子,参与干细胞的自我更新,在多能性细胞和生殖细胞正常发育过程的起始、维持和分化过程中均发挥作用,对胚胎发育早期阶段有特异性作用。Oct-4在哺乳动物胚胎干细胞和胚胎生殖细胞中表达,在胚胎和生殖细胞肿瘤中Oct-4表达显著增高,在分化的或成熟的组织中表达水平降低或消失。近期研究发现,成体干细胞中也有Oct-4的表达,体细胞肿瘤中也有Oct-4阳性表达的报道,但细胞分化后Oct-4表达消失。所以,本研究在于通过对结直肠癌组织中Oct-4蛋白表达的免疫组织化学的研究,探讨其表达规律及其表达与结直肠癌临床病理因素的相关性,及与结直肠癌化疗疗效、预后复发的关系,为临床诊治及预后评价提供依据。方法:用免疫组化法测定山羊多克隆抗体Oct-4在结直肠癌组织中的表达,免疫组织化学采用链霉素抗生物素.过氧化物酶(SP)法,步骤简述如下:活检组织常规石蜡包埋、切片,所有石蜡切片按照4μm切片,切片常规脱蜡,抗原修复,3%H2O2孵育30min,再滴加山羊血清封闭非特异性抗原30min,滴加Oct-4山羊多克隆抗体一抗,4℃过夜,再滴加二抗,37℃孵育30min,然后DAB显色,固定。采用未免疫的相应血清取代一抗做阴性对照,采用已知阳性切片做阳性对照,阳性显色为核棕色。应用SPSS10.0软件进行统计学处理,采用χ2检验,取p<0.05为检验水准结果:1.Oct-4阳性表达在细胞核呈集中分布,呈深棕色,结直肠癌病人细胞核呈明显的深棕色,Oct-4表达呈阳性,结直肠癌中Oct-4阳性表达率为30.63%(49/160),在正常结直肠粘膜上皮组织未发现Oct-4阳性表达,差异有统计学意义(P<0.05)。2.低分化的结直肠癌Oct-4阳性表达率为44.12%(30/68),中分化组Oct-4阳性表达率27.98%(17/63),高分化的结直肠癌Oct-4阳性表达率6.89%(2/29)。低分化组Oct-4阳性表达率>中分化组>高分化组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.Dukes’D期的Oct-4阳性表达率最高,为61.9%(13/21),Dukes’C期的Oct-4阳性表达率为41.67%(25/60),Dukes’B期Oct-4表达率20.41%(10/49),Dukes’A期Oct-4表达率3.33%(1/30),差异有统计学意义。4.Oct-4的表达与年龄、性别、病理类型无明显相关,差异无统计学意义。5.Oct-4在结直肠癌有淋巴结转移组的阳性率为43.38%(34/79),在无淋巴结转移组的阳性表达率为18.52%(15/81).两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。6.Dukes C期患者中Oct-4阳性表达组的2年内有复发或转移发生率(92%,23/25)明显高于Oct-4阴性表达(65.71%,23/35)的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.Oct-4蛋白表达可能与结直肠癌的发生相关。2.Oct-4蛋白表达和阳性表达程度可能与结直肠癌的恶性程度呈正相关,与结直肠癌Dukes分期、淋巴结转移呈正相关,可能对反映结直肠癌的生物学行为有意义。3.Oct-4蛋白表达可能与结直肠癌的复发转移呈正相关,可能对结直肠癌的预后评价有一定的临床意义。