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背景:骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)是源于造血干细胞水平的克隆性疾病,以骨髓病态造血、外周血细胞减少并且高风险向急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)分化为特点,诊断上主要依靠骨髓细胞形态学和遗传学异常改变,但部分MDS患者缺乏特异性异常,至临床诊疗困难。流式细胞术(flow cytometry,FCM)可以很清楚的分辨细胞的异常表达,在骨髓恶性肿瘤的定性和定量诊断上起着越来越重要的作用,已有很多报道流式细胞术在MDS诊断中的潜在价值,2009年Ogata提出四参数流式积分系统,结果初步提示用于诊断MDS方法快速简单,成本低,特异性较好,但敏感度欠缺(敏感度从30%至70%不等,特异度从80%至90%以上),所以尚需要更多的临床研究予以证实或在此基础上进行优化改良,本课题组前期研究结果提示该积分系统对MDS的诊断有价值,但随着样本量的增加发现完全套用Ogata积分法误诊率较大,故在此基础上我们根据MDS粒细胞免疫表型特点增补一个新的积分参数:粒细胞与淋巴细胞CD10平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)比值,并对新参数的检测和分析方法,以及加入新参数后的改良积分法对MDS的诊断价值进行了研究。目的:基于传统四参数积分系统,建立辅助MDS诊断的五参数流式积分系统,并评价其临床实用性。方法:回顾性分析我院320例因外周血细胞减少行骨髓穿刺检查患者骨髓流式参数,依照时间为节点分为两部分:研究组,140例(用于五参数流式积分系统的建立)和验证组,180例(验证该积分系统的临床应用价值)。入选研究组病例初诊时均诊断明确(MDS的诊断根据2014版国内MDS诊疗专家共识标准),包括MDS患者34例,非MDS患者106例;验证组初诊时包括29例MDS患者,86例非MDS患者,65例血细胞减少原因待查患者,经过临床至少6个月跟踪随访,最终诊断MDS患者31例,非MDS患者149例。应用多参数流式细胞仪,在传统CD34-FITC/CD19-PE/CD33-APC/CD45-PC7抗体组合基础上新加CD10-FITC/CD45-PC7抗体组合,分别比较各组患者下列五参数的表达(参数1:全部有核细胞中髓系前体细胞所占百分比;参数2:前体细胞中B系所占百分比;参数3:淋巴细胞与髓系前体细胞CD45平均荧光强度的比值;参数4:粒细胞与淋巴细胞侧向角(side scatter,SSC)的比值;参数5:粒细胞与淋巴细胞CD10平均荧光强度比值),设立cut-off值,建立辅助MDS诊断的五参数流式积分系统,并评价其诊断效能。结果:1.与非MDS患者相比,MDS患者髓系前体细胞比例明显升高(P=0.008);前体细胞中B系所占比例明显降低(P<0.001);髓系前体细胞CD45平均荧光强度表达虽未见明显统计学差异(P=0.241),但表达模式异常;粒细胞与淋巴细胞侧向角比值明显降低(P<0.001);粒细胞与淋巴细胞CD10平均荧光强度明显降低(P<0.001)。2.确定流式积分系统每一参数的参考值范围(参数一为≥1.35,参数二为≤0.75,参数三为≤1.0或≥7.0,参数四为≤5.94,参数五为≤3.15),赋予符合标准者每一参数1分,以≥2分诊断为MDS,敏感度达85.3%,特异度为87.7%。3.改进的五参数流式积分系统较传统四参数流式积分系统诊断准确性明显提高,差异有统计学意义(χ~2值为13.581,P<0.001)。4.MDS患者的流式积分与修订版国际预后积分系统(revised international prognostic scoring system,IPSS-R)危险度分层呈正相关(r值为0.752,P<0.001)。结论:改进的五参数流式积分系统可以辅助MDS的诊断,且较传统四参数积分系统诊断敏感度与特异度均明显提高,分析方法简单易行,为临床诊断MDS提供了新的思路。