马铃薯病原真菌拮抗细菌鉴定及其生物学功能研究

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本试验以马铃薯枯萎菌(Fusarium tricinctum)、马铃薯立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)和马铃薯炭疽菌(Colletotrichum coccodes)3种马铃薯病原真菌为靶标菌,筛选出对其具有抑制作用的拮抗细菌进行了形态学、16s rRDNA基因序列、生物学功能及特性等方面研究,主要获得以下结果。1.马铃薯病害拮抗菌的筛选与鉴定从103株细菌中筛选出了40株对3种马铃薯病原真菌均有具有抑制作用的拮抗细菌,通过形态学与16SrDNA基因序列同源性分析,初步确定枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis11个菌株,解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens13个菌株,苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis4个菌株,甲基营养型芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus3个菌株,墨海威芽孢杆菌Bacillus mojavensis3个菌株,特基拉芽孢杆菌Bacillus tequilensis3个菌株,蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus、Bacillus axarquiensis、多粘类芽孢杆菌Paenibacillus polymyxaisolate各为1个菌株。2.拮抗细菌抑菌作用获得的4种拮抗菌O72、O47、S27和Z13对3种马铃薯病原真菌的抑制率均在50%以上。用拮抗细菌菌处理病原菌后,病原菌菌丝细胞出现泡囊、肿胀、继而崩解;或细胞壁溶解、菌丝原生质渗漏、菌丝断裂、消解。3.拮抗细菌的溶磷和促生作用菌株分泌IAA的测定结果表明,在加入色氨酸的King培养液中,菌株O47、072,S27和Z13分泌IAA的量分别为31.86ug/ml,20.94ug/ml,20.15ug/ml和23.92ug/ml,而在不加色氨酸的King培养液中分泌IAA的量为20.62ug/ml,16.28ug/ml,6.16ug/ml和10.04ug/ml;菌株O72、O47、S27和Z13均对无机磷Ca3(PO4)2具有良好的溶解能力,但仅有Z13对有机磷卵磷脂具有一定的溶解能力;浸种和浇灌S27菌液,对黄瓜、番茄和甘蓝3种作物苗期生物量鲜重和干重均有显著增加,而O47、 O72和Z13分别对甘蓝、番茄和对黄瓜有促生作用。4.拮抗菌株生物学特性4株拮抗菌适温均为30℃、适宜酸碱度pH=7,并具有耐高温、耐盐碱性的特性;连续继代培养20代后,仍具有良好抑菌作用。3.拮抗菌S27抑菌物质粗提液理化特性在3种有机萃取溶剂中,以乙酸乙酯萃取出菌株S27的抑菌物质最多,对马铃薯丝核的抑制率达到62%;抑菌物质粗提液在温度为30℃,pH=6时,其抑菌活性最高,并且在高温、强酸碱、辐射等不利条件下仍具有较好的抑菌活性。通过上述研究结果显示,筛选出的4种菌株在拮抗作用、溶磷和促生作用以及耐高温、耐盐碱性等特性均表现良好,具有良好的开发前景,为其进一步开发生物菌肥及农药提供了理论依据。
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