重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)是临床上常见的一类急腹症，是一种发病急、病情进展快、并发症多，并伴有极高死亡率的严重疾病。其发病机制复杂，目前尚未完全清楚。在急性胰腺炎中，胰腺坏死的程度并不是决定疾病预后的唯一因素，胰腺的继发感染也起着重要的决定作用，而继发感染通常是由细菌通过受损肠粘膜移位引起的。研究发现，SAP时肠粘膜上皮细胞间的紧密连接被破坏，肠道细菌、内毒素进入体循环导致肠源性内毒素血症,刺激已经活化的单核-巨噬细胞，释放过量的细胞因子和炎性介质，加速败血症的进程，促使全身炎症反应综合征（systemic inflammatory responsesyndrome，SIRS）的发生,对胰腺等脏器构成严重的“第二次打击”,甚至诱发和加重多器官功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS），最后甚至引起死亡。因此，改善肠道的屏障功能可能是预防或改善SAP诱导的肠道功能障碍的新对策。Occludin蛋白作为紧密连接上的主要蛋白之一，其功能状态对上皮/内皮通透性变化起着重要调控作用，对维持紧密连接基本结构和功能起到重要作用，已成为当前临床疾病治疗的重要靶点。随着糖生物学、糖化学等的发展，许多糖类的抗炎免疫调节作用被发现。目前研究发现甘露糖在人体内具有抗炎，调节免疫系统，加速伤口愈合，抑制肿瘤生长与转移，增加癌症存活率等生理效应。那么甘露糖对急性胰腺炎及其诱导的肠粘膜屏障功能损伤有无保护作用，目前国内外未见报道。目的：通过构建SAP大鼠模型，观察SAP发病早期肠道粘膜屏障功能的变化情况以及肠道上皮紧密连接蛋白Occludin的蛋白及mRNA表达变化，研究甘露糖对急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障损伤的保护作用，并探讨其可能的作用机制。方法：将60只SD大鼠随机分成假手术（SO）组、SAP组和甘露糖（MT）组，每组等分为6h、12h2个亚组，每组各10只，采用胰管内逆行注射5％牛磺胆酸钠的方法制作动物模型。分别于造模后6h、12h留取血、胰腺、回肠组织，通过HE染色观察胰腺、肠道的病理变化，检测血浆内毒素和D-乳酸以评价肠粘膜通透性，采用RT-PCR、Western-blot的方法观察比较三组肠粘膜上皮Occludin蛋白及mRNA的表达差异。结果：(1)胰腺病理评分：HE染色观察，SO组大鼠胰腺腺泡及胰岛组织结构清晰，偶有坏死细胞及出血灶，无炎症细胞；SAP模型诱发后胰腺组织结构紊乱，间质水肿明显，可见腺泡细胞坏死，可见出血，炎性细胞浸润，并随着时间进展而渐进性加重；MT组胰腺组织结构紊乱程度轻，小叶间有区域性水肿，可见坏死细胞及出血灶，少量炎症细胞浸润。病理学评分证实，所有SAP组（6h8.33±1.53；12h10.67±1.53）、MT组（6h4.33±0.58；12h6.33±1.53）各时间点胰腺病理学评分与SO组（6h0.67±0.58；12h2.33±1.16）比较，都有所升高（P＜0.05），其中SAP组升高更为显著（P＜0.01）；MT组与SAP组各时间点比较，评分下降（P＜0.05），12h组更为显著（P＜0.01）；但各组两个时间点之间相比，无明显差异（P＞0.05）。（2）肠道病理评分：HE染色观察，SO组大鼠肠粘膜未见明显损伤，肠粘膜上皮及绒毛形态完整（6h0.67±1.15；12h0.67±0.58）；SAP组和MT组肠粘膜可见不同程度的破坏，SAP组可见上皮细胞层坏死、脱落，部分绒毛脱落，毛细血管扩张、充血（6h3.33±0.58；12h3.67±0.58），与SO组相比，评分明显升高（P＜0.01）；MT组（6h1.33±0.58；12h1.33±0.58）较SAP组病理改变显著减轻，绒毛排列基本整齐，固有层轻度水肿，无明显细胞坏死（P＜0.05），MT组与SO组相比，虽然评分有所升高，但无统计学意义（P＞0.05）；各组两个时间点之间相比，无明显差异（P＞0.05）。（3）血浆内毒素水平（mmol/L×10-2）：与SO组各时间点比较（6h12.22±0.88；12h12.65±1.44），SAP组、MT组大鼠血浆内毒素含量均明显升高（P＜0.01）；MT组（6h13.93±0.64；12h16.56±0.75）与SAP组（6h15.00±0.67；12h17.60±1.00）相比，均有下降（P＜0.05）各组两个时间点之间相比，除SO组外，12h组均显著高于6h组，具有统计学意义（P＜0.01）。（4）血浆D-乳酸水平：与SO组各时间点（6h0.81±0.11；0.91±0.09）比较，SAP组（6h1.20±0.12；12h1.33±0.15）大鼠血浆D-乳酸含量显著升高（P＜0.01）；MT组（6h0.98±0.07；12h1.10±0.12）与SO组相比，含量升高（P＜0.05）；MT组与SAP组各时间点相比，D-乳酸含量均下降，具有统计学意义（P＜0.05）；各组两个时间点之间相比，除SO组外，其余两组12h D-乳酸含量均高于6h（P＜0.05）。（5）RT-PCR检测Occludin mRNA表达情况：SAP组和MT组Occludin mRNA的量较SO组均下降，其中SAP组6h、12h mRNA的量分别为SO组的0.51±0.06，0.80±0.05倍；MT组分别是SO组的0.61±0.03，0.86±0.05倍，经统计学检验有显著差异（P＜0.01）；MT组6h、12h分别为SAP组的1.20±0.21，1.09±0.13倍有显著差异（P＜0.05）；SO组两时间点相比无显著差异（P＞0.05），SAP组和MT组两时间点相比，12h mRNA的量均高于6h，且有显著差异（P＜0.01）。（6）Westernblot检测Occludin蛋白的表达情况：各组在65KD处可见特异性的蛋白条带，随着SAP进展，肠道组织Occludin蛋白表达逐渐下降。SAP组（6h0.23±0.02；12h0.25±0.00）与SO组两个时间点（6h0.36±0.02；12h0.36±0.01）相比，蛋白表达均明显下降，具有统计学意义（P＜0.01）；MT组各时间点（6h0.30±0.01；12h0.33±0.01）蛋白水平明显低于SO组（P＜0.01），与SAP组相比均上升（P＜0.05），其中6h上升显著（P＜0.01）；各组两个时间点之间相比，MT组有差异（P＜0.05），其他两组无明显差异（P＞0.05）。结论：（1）甘露糖能改善胰腺和肠道组织的病理变化；（2）甘露糖改善急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障损伤，降低肠粘膜的通透性，增加Occludin蛋白的表达，降低血浆D-乳酸和内毒素水平；（3）甘露糖对急性胰腺炎肠粘膜屏障损伤具有保护作用，作为一种安全无毒的简单单糖，甘露糖在预防和治疗肠粘膜屏障损伤方面具有进一步研究的价值。