【研究背景】桥本氏甲状腺炎（Hashimoto’s thyroiditis, HT）又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎，于1912年由日本学者桥本策博士首先报道而得名，是人类最常见的器官特异性自身免疫性疾病。临床上，HT常见于女性，患者血清常有多种自身抗体。HT的主要病理学表现为：甲状腺内大量淋巴细胞浸润及次级淋巴滤泡形成，甲状腺滤泡上皮细胞常嗜酸性变（Hürthle细胞形成）并进行性破坏。 HT不仅会引起甲状腺功能持续低下，而且与甲状腺癌及恶性淋巴瘤的发生相关，严重影响患者的生活质量甚至生命。该病虽经百年研究，其病因及发病机理仍未阐明。大量研究表明，遗传以及环境因素与HT的病因密切相关，其中环境因素中的病毒感染越来越受到关注。但其发病机制目前并不清楚。人细小病毒B19（parvovirus B19, B19）是一种无包膜单链DNA病毒，属于自主性细小病毒，与非自主性细小病毒的区别即在宿主细胞中的复制并不需要其他病毒的参与。是小病毒属中唯一对人类致病的病毒。B19感染与多种疾病发生密切相关，其中，与HT的关系是该领域的最新发现之一。我们实验室以及美国、德国、日本多个实验室的独立研究表明，B19感染与HT的发病有关，但其机制尚需进一步研究。二十世纪末，Hoffmann和Beutler先后在果蝇和小鼠细胞中证实了Toll样受体（Toll-like receptors, TLRs）的存在。作为一大类细胞膜受体分子，TLRs能够识别病毒等病原微生物，启动固有免疫反应并产生大量的促炎症因子和共刺激分子，诱导适应性免疫的发生。由于这两位科学家在先天免疫激活方面的突出贡献，他们同时获得了2011年诺贝尔生理学或医学奖。TLR3作为TLR家族的重要成员之一，主要表达于树突状细胞，通过识别病毒dsRNA，激活NF-ΚB, IRF3以及AP-1参与抗病毒反应。有研究发现，TLR3在HT甲状腺滤泡上皮细胞中有表达，间接提示HT发生与某种感染有关。鉴于以上两方面的研究，我们推测，B19感染很可能激活了TLR3的表达。在HT报道百年之际，我们使用HT连续切片用免疫组织化学方法及免疫组织化学双标记方法，研究了B19和TLR3在HT中的关系，对揭示B19感染与HT的发病机制提供了新的实验依据。【目的】阐明桥本氏甲状腺炎病变甲状腺组织中B19感染与TLR3间的关系，为HT的病毒病因学提供新的实验依据。【方法】1.用免疫组织化学SP法分别在HT标本中检测B19及TLR3的表达情况，利用Image Pro-Plus6.0软件得到阳性细胞数，计算阳性率。2.用免疫组织化学双标法分析B19及TLR3在HT病变甲状腺组织中的共表达（或共定位）情况。3.采用spearman等级相关分析B19和TLR3在HT中的相关性，应用Fisher精确概率法分析B19和TLR3在HT和正常甲状腺组织中表达的差异。【结果】1. B19和TLR3主要表达在HT病变甲状腺组织中近淋巴滤泡的甲状腺滤泡上皮细胞内。33例HT病例中，29例B19阳性，4例阴性；33例HT病变甲状腺组织均表达TLR3。而在5例正常甲状腺组织中两者均为阴性。统计学分析显示，TLR3和B19在HT（33/33,100%;29/33，88%）和正常甲状腺组织中的表达具有显著差异TLR3（p＜0.001），B19（p＜0.001）。2.对33例HT标本TLR3和B19阳性细胞进行计数，计算阳性率并进行相关性分析，发现在HT中B19和TLR3表达呈显著正相关（r=0.565,p=0.001）。3.免疫组织化学双标染色进一步证实，B19与TLR3在HT甲状腺滤泡上皮细胞中存在共表达。【结论】发现桥本氏甲状腺炎病变甲状腺组织中TLR3表达与B19感染密切相关，提示TLR3表达很可能是B19感染诱导所致，表明两者在HT的病毒病因学及发病机理中起重要作用。