目的：　　本实验拟通过对乳腺癌患者的癌组织进行体外细胞原代培养，观察其生长状况及规律，适时的进行细胞传代及冻存，为后续的HSP70-HER蛋白复合物提纯及检测提供基础准备工作。　　方法：　　选取2014年2月至2015年1月期间在内蒙古自治区人民医院住院患者52例作为志愿者，所有患者病理学诊断明确，均为初次诊断及手术，患者在进行手术治疗切除乳腺癌组织前必须未接受过任何的内分泌治疗、放射治疗及化学药物治疗，患者的年龄范围为28-74岁，平均年龄为47.67±11.78岁。术前告知志愿者后续可能需要捐献少量的外周血和乳腺癌组织，与患者及家属签署自愿同意书，记录患者相关情况并配以数字代码。术中留取部分癌组织待术中冰冻结果明确后放入盛有无菌乳腺癌洗涤液的离心管中。后在超净工作台中对癌组织进行初步处理。对已处理的组织进行消化，消化后细胞计数，根据所得的细胞数将乳腺癌细胞接种于相应的细胞培养板或细胞培养瓶中，加入培养液使细胞均匀的悬浮于培养液中，二氧化碳的培养箱中进行培养。每日观察细胞的生长状况，定期换液、细胞传代，当细胞数达到后续实验所需时进行细胞计数得到具体数值冻存细胞并留取少量细胞进行纯度及细胞活率检测。　　结果：　　（1）所取乳腺癌组织标本大小范围为0.25-1.2cm3，平均大小为0.68±0.25cm3，对组织进行消化后细胞数范围为4.03-14.00X105/ml.平均细胞数为8.76±2.35X105/ml.消化时间范围为10-24h，平均消化时间为14.62±1.81h。　　（2）细胞原代培养24小时后，显微镜下观察可见大部分细胞呈贴壁状态，少量细胞仍悬浮于培养液中，不能贴壁。培养48小时后，镜下观察细胞基本全部呈贴壁生长。培养过程中平均每两天进行一次细胞换液，每三天进行一次细胞传代。　　（3）当肿瘤细胞培养至9-10天，传代至第三代后，细胞生长旺盛，迅速生长，镜下观察细胞形态良好且细胞数大量增加。当细胞增殖达到一定数量后对细胞进行冻存，冻存前对细胞行检测细胞活率均高于86％,对细胞进行HE染色后，经本院病理诊断科观察后肿瘤细胞纯度均在75%以上。　　（4）随着培养天数的增加，肿瘤细胞生长活力下降，数量逐渐减少，当细胞传至第五代后，镜下观察肿瘤细胞形态变差并大量出现死亡细胞，不能够进行下一次传代，部分细胞可见成纤维细胞生长并增殖。　　（5）所培养的52例乳腺癌细胞中，40例成功冻存；细胞发生污染现象8例，其中细菌污染7例，真菌污染1例；6例细胞未生长增殖到冻存所需状态。细胞培养成功率为76.92%。　　结论：　　（1）乳腺癌细胞可以进行体外选择性原代培养并增殖达到冻存，且经过本实验的培养方法可以获得纯度较高的乳腺癌细胞。　　（2）定期的进行换液和细胞传代能够为肿瘤细胞的生长提供良好的环境，能促进乳腺癌细胞的生长。细胞传代可在一定程度上刺激乳腺癌细胞生长并增殖。　　（3）准确地细胞活率检测及肿瘤细胞纯度检测能够为后续的实验提供重要的借鉴工作。　　（4）细胞冻存条件的掌握能够为后续细胞复苏提供准备工作。