RT-PCR结合体外转录检测丙型肝炎病毒RNA的方法学研究

来源 :湖北医科大学 武汉大学医学部 武汉大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:houduo
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该文用丙型肝炎病人血清作标本,采用简化的异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法从病人新鲜血清中提取丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)RNA作模板,参照国内外已报道的HCV基因组序列5端非编码区(5NCR)设计并合成含T<,7>噬菌体RNA聚合酶结合位点的引物,进行单管(one-house)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR).该实验方案具有简便、快速、特异、敏感等特点,可用于HCV,特别是低滴度HCV RNA的检测.而且作为一种分子生物学的有力手段,可用于体外合成功能性mRNA,合成反义RNA或标记的单链RNAR探针,以及PCR产物直接快速测序的另一有效选择方案.
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