论文部分内容阅读
自从人类跨入21世纪以后，伴随着纳米技术的不断发展人们的生活在发生着巨大的改变。纳米科技的发展不仅带动了许多其他学科的发展，同时也产生了很多新兴的交叉学科。纳米技术与生命科学的结合所产生的纳米生物技术是目前世界上的研究热点课题，且是未来产业化发展的一个前途光明的方向。胶体金免疫层析方法是一种将胶体金标记、免疫检测和层析分析技术等多种方法有机结合在一起的固相标记免疫检测技术，其特点是灵敏、便捷、安全、低成本等。视黄醇结合蛋白是人血液循环中维生素A的特异性转运蛋白，他的功能是通过反式视黄醇的形式将维生素A从肝脏转运到肝脏之外的其他组织。肾脏对多种维生素的代谢调节有着十分重要的作用，一般情况下维生素在通过肾小管滤过时被重新吸收。如果肾小管功能发生异常，重吸收作用就会发生异常变化，尿液中RBP的浓度会显著上升。目前RBP被公认为是一个很好的肾小管损伤的早期诊断标志物，RBP的检测已被广泛用于临床肾脏病的诊断中。本文致力于制备一种胶体金免疫层析法的视黄醇结合蛋白检测试剂，为肾脏病的诊断提供一种快速、简便且廉价的检测手段，让肾脏病的早期筛查可以得到大规模的普及。（1）采用胶体金免疫层析技术制备视黄醇结合蛋白检测试剂。实验对检测试剂的制备进行了摸索，阐述了胶体金免疫层析法视黄醇结合蛋白检测试剂的制备方法；对试剂进行了功能性试验，对检测试剂的性能进行了全面的评估。实验结果表明，该检测试剂灵敏度在300ng/mL，特异性、重复性以及批间差良好，试剂在37℃条件下可稳定20天，相当于常温条件下有效期2年。（2）对制备好的视黄醇结合蛋白检测试剂进行临床验证试验。对本试剂和已批准上市的对照试剂盒（上海太阳生物技术有限公司生产的ELLISA法RBP含量测定试剂盒）进行对比试验，分析本品与已该产品在检测结果上的相关性。两种检测方法的诊断结果的一致性良好（市一医院：K=0.9070，95%CI：0.8277～0.9863，P<0.01；市六医院：K=0.9391，95%CI：0.8714～1.000，P<0.01）。胶体金方法诊断肾小管损伤的灵敏度和特异度，市一医院：灵敏度=100%，精确95%CI为：92.45%～100.00%；特异度=91.80%，精确95%CI为：81.90%～97.28%；市六医院：灵敏度=100%，精确95%CI为：91.40%～100.00%；特异度=95.00%，精确95%CI为：86.08%～98.96%。