作为柑橘生产大国,我国柑橘的主要栽培品种多以鲜食为主。随着社会经济的高速发展,消费者对柑橘果实的内在与外观品质均提出了更高的要求。柑橘果实的内在品质主要包括:柑橘果实的风味,营养成分,糖酸的含量等;外观品质主要包括果实的形状,果形指数,果实色泽等。果实采摘后,其自身的营养供给立刻被切断,果实衰老相关的一些生理、生化指标发生显著的改变,进而导致柑橘果实品质发生劣变。作为动植物细胞中的一种重要的细胞器,线粒体直接参与细胞衰老。线粒体的形态和生理状态与柑橘果实采后生物学特性关系密切,但在柑橘果实中尚未开展系统的研究,因此,分离柑橘果肉组织的线粒体是深入开展果实内在品质变化研究的重要前提条件。另一方面,油斑病(Oleocellosis)是柑橘采后一种十分常见的生理性病害,会严重降低果实的外观品质,但其发病机理尚不明确,通常认为与果皮油胞破裂和精油外渗有关,但还缺乏实验证据的支持。为此,本研究分别以“国庆一号”温州蜜柑(Citrus unshiu“Guoqing No.1”)和伏令夏橙(Citrus sinensis Osbeck)为主要实验材料摸索果肉组织线粒体分离的技术体系,以温州蜜柑、纽荷尔脐橙和早红脐橙为研究材料,探究精油成分的差异与油斑病的关系。主要结果如下:1、线粒体分离缓冲液的蔗糖浓度因品种不同而不同,温州蜜柑最适合的蔗糖浓度为0.5 M,而夏橙为0.4 M。通过一次Nycodenz不连续密度梯度离心,线粒体出现在14%和21%的密度梯度界面处。线粒体分离产物Western Blot分析结果表明,通过该方法分离的线粒体基本是完整的,基本不含有有色体,过氧化物酶体,细胞质的污染,但是液泡的污染较严重。2、针对温州蜜柑、纽荷尔脐橙、早红脐橙这三个品种柑橘四个生长发育时期的精油成分进行分析。不同时期之间和不同品种之间的比较结果表明,在早红脐橙的四个生长发育时期中,γ-萜烯、异松油烯、β-芳樟醇、香茅醛、橙花醛、紫苏醛、α-石竹烯在早红脐橙转色期显著上调积累;而在转色期的温州蜜柑、纽荷尔脐橙、早红脐橙精油中,香桧烯,月桂烯,β-芳樟醇,橙花醛,香叶醛,β-荜澄茄油烯,β-法呢烯,(Z,E)-α-法呢烯,1-辛醇,辛醛,壬醛,癸醛,十二醛在转色期的早红脐橙精油中显著上调积累。3、使用转色期的早红精油涂抹转色前后的温州蜜柑果面的结果表明,转色前的温州蜜柑对精油的敏感程度更高,具体表现在油斑病的病斑面积更大,褐变更严重。紫外灯照射油斑病病斑部位的结果也表明,油斑病病斑部位在紫外灯的照射下会显现出黄色的荧光。冰冻切片的结果表明,油斑病发病部位的果皮组织结构发生显著的变化,病斑部位的薄壁细胞有明显的扁平化的趋势。4、温州蜜柑,纽荷尔脐橙,早红脐橙不同生长发育时期的精油涂抹转色期早红果面结果表明,通过该方法诱发的油斑病的病斑大小直径并没有显著差异。但是使用转色期的早红精油涂抹转色前与转色后的早红果面的结果表明,转色前的早红果面对精油的响应程度较转色后的早红果面要更加敏感,具体表现在诱导的油斑病病斑直径更大,病斑增大速率更快。