CCR5在脑出血继发性神经功能损伤与恢复中作用的研究

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目的:脑出血是临床上常见的且病死率与病残率都极高的神经系统性疾病,其病理主要过程为原发性损伤与继发性损伤。当前研究表明继发性损伤是脑出血后影响神经功能修复的主要原因。趋化性细胞因子受体5(C-C Chemokine receptor 5,CCR5)是一种细胞膜上广泛分布的g蛋白偶联受体,已被证明是抗炎治疗的一个可行靶点。本研究旨在探究CCR5在脑出血继发性损伤中的作用及其可能机制。方法:将同一遗传背景两种基因型(野生型WT/基因敲除型CCR5(-/-))的C57BL/6共100只随机分成四组,即野生型生理盐水组(WT Saline组)、野生型脑出血组(WT ICH)、基因敲除生理盐水组(CCR5(-/-)Saline组)、基因敲除脑出血组(CCR5(-/-)ICH组),运用立体定位注射胶原酶法及等量生理盐水构建小鼠基底节脑出血模型及其对照组。于造模成功后于6小时(h)、1天(d)、3天(d)、7天(d)、14天(d)、28天(d)进行行为学试验比较两种基因型小鼠神经功能缺损及恢复情况;并采用免疫荧光、免疫组织化学染片、苏木素-伊红染色、免疫印迹观察分析各组血肿体积及其扩大情况、小胶质细胞和神经元细胞在不同组内分布情况、铁死亡指标谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)阳性细胞在不同组内分布情况。结果:在小鼠脑出血模型中,敲除CCR5可以减少脑出血后血肿体积;促进神经功能恢复;减少小胶质细胞活化;减轻神经元损伤并促进神经元恢复;抑制TLR4/NF-κB通路减轻神经炎症反应;降低脑出血后GPX4的丢失。结论在小鼠脑出血模型中,敲除趋化性细胞因子受体5可以减轻小鼠脑出血后继发性损伤,这种获益可能通过减少铁死亡特异性指标的GPX4消耗及抑制炎症通路TLR4/NF-κB来实现。
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