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叶片是植物进行光合作用、积累同化物的重要场所，是植物重要的器官。作为叶片发育的最后阶段，叶片衰老在植物的这个阶段起着重要的作用。叶片衰老会引起光合能力的下降，因而它是作物产量的限制因素之一。水稻是世界上种植面积最大的粮食作物之一。因此，加强水稻叶片衰老机制的理论研究对生产有着重要的意义。A4（LOC_Os12g43970）基因是从早衰超表达家系OX2转基因的芯片结果中挑选的，该基因在芯片中上升14.5倍。根据CREP (http://crep.ncpgr.cn/)中的芯片结果，预测其是一个叶片衰老相关基因。在研究基因功能方面，干涉基因的表达比超表达该基因的效果更有说服力。基于之前的试验结果，我们首先对该基因构建了干涉载体并通过农杆菌介导法转化到中花11上，进行单拷贝检测和表达量检测；观察转基因植株的叶片衰老进程是否发生变化；其次，构建衰老文库和酵母双杂交载体，寻找互作蛋白。希望能进一步认识水稻叶片衰老相关分子机理，为培育延缓叶片衰老的水稻材料提供可行的方法。主要研究结果有：1.利用pDS1301载体，构建了A4的干涉载体，并将其转化到农杆菌EHA105中，然后用农杆菌介导法转化水稻品种中花11，获得66个转基因后代，阳性检测结果表明其中有45个阳性单株，阳性率为68.18%；2.利用地高辛技术对获得的阳性苗进行Southern拷贝数检测，获得了6个单拷贝单株；3.在水稻抽穗后14天的剑叶中，利用荧光实时定量PCR对单拷贝单株进行了RNA表达量的检测，4个单株表达量相比对照下降了25~50%左右，说明干涉得到了明显的效果；4.构建了中花11衰老叶片文库（SL)；5.构建了A4全长cDNA的酵母双杂交载体并进行了酵母转化和自激活试验，发现pGBKT7-A4载体对菌株AH109具有自激活活性。