目的:本研究以中医脾脏象理论为支撑,利用ELISA、Western Blot、UFLC-IT-TOF-MS等现代实验技术,对脾阳虚证大鼠回肠组织中线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ、Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶、GSH-Px活性及MDA含量进行检测;大鼠回肠组织中VIP、CCK、GIP、cAMP、PKA相应含量及蛋白相对表达量测定;大鼠回肠组织和血清代谢产物分析。旨在寻找其相关病理调控机制及其相互作用,继而从分子生物学角度揭示脾阳虚证脾失健运的机理,最终为脾阳虚证量化指标提供理论支撑,为临床诊疗提供依据。材料与方法:SPF级健康SD大鼠44只,随机分为三组,即正常对照组、脾阳虚证模型组、中药反证组,并采用经典复合因素造模方法塑造脾阳虚证模型,即饮食不节、劳倦过度结合苦寒伤阳药。造模共分两个阶段,第一阶段建立脾气虚证模型,第二阶段在脾气虚证模型基础建立脾阳虚证模型,每个阶段各8天。在造模第8、16天两个不同时间节点处,运用症状评价方法联合模糊数学中模式识别方法对大鼠造模整体情况进行综合评价,以判断模型成功情况。通过光镜观察各组大鼠模型回肠组织病理学改变,ELISA检测各组大鼠回肠组织中线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ、Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶、GSH-Px活性及MDA含量;非靶向代谢组学检测代谢产物变化情况;ELISA、Western Blot检测大鼠回肠组织中VIP、CCK、GIP、cAMP、PKA相应含量及蛋白相对表达量。结果:1.各组大鼠回肠组织病理学检测结果在100×光镜下观察到:正常对照组大鼠回肠各层组织结构完整,纹理清晰,且无炎性反应及损伤;脾阳虚证模型组大鼠回肠组织出现绒毛变矮或消失,腺体排列紊乱,结构不清,局部有炎性渗出、腺体萎缩、坏死等病理改变;中药反证组大鼠回肠组织结构与模型组比较,绒毛基本恢复正常,腺体排列较整齐。2.各组大鼠回肠组织能量代谢及脂质过氧化相关生化指标测定结果脾阳虚证模型组大鼠回肠组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅳ活性及Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶、GSH-Px活性与正常对照组比较,均呈下降趋势,且有统计学意义（P<0.01）;但中药反证组则出现回升趋势（P<0.01,P<0.05）,仍低于正常水平（P<0.05,P<0.01）。与正常对照组相比,脾阳虚证模型组大鼠回肠组织中MDA含量明显上升,且有显著差异（P<0.01）;经中药干预治疗后,有显著下调（P<0.05）,但未恢复正常水平（P<0.05）。3.各组大鼠血清及回肠组织代谢产物代谢组学检测结果对脾阳虚证模型组大鼠和正常对照组大鼠血清及回肠组织进行非靶向代谢组学检测,血清中共筛选出脯氨酸、苏氨酸1、缬氨酸、油酸等42种差异性代谢产物;回肠组织中筛选出甘露精1、磷酸甲酯、酪氨酸2、核精等24种差异性代谢产物,涉及蛋白质、脂肪酸等多种代谢产物的异常。4.各组大鼠回肠组织脑肠轴相关生化指标（ELISA）检测结果与正常对照组比较,脾阳虚证模型组大鼠回肠组织中VIP、CCK、GIP、cAMP、PKA含量均有显著升高（P<0.01）,而中药干预后则表现出回落的趋势,有统计学意义（P<0.01）。5.各组大鼠回肠组织脑肠轴相关目的蛋白（Western Blot）检测结果与正常对照组比较,脾阳虚证模型组大鼠回肠组织中VIP、CCK、GIP、cAMP、PKA蛋白相对表达量均有显著升高（P<0.01）,而经中药干预后则表现出回落的趋势,有统计学意义（P<0.01）。结论:1.脾阳虚证脾失健运通过影响机体内线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ、Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶、GSH-Px活性、MDA含量,以及蛋白质、脂类、糖相关代谢产物,继而导致物质能量代谢异常、脂质过氧化损伤。2.脑肠轴通过调节与脑肠轴调节相关的脑肠肽VIP、CCK、GIP水平导致上述改变,进而影响胃肠道的消化吸收功能,而cAMP作为信号转导通路的第二信使、PKA为信号转导下游激酶参与整个病变过程,VIP-cAMP-PKA、GIP-cAMP-PKA很可能是其中的重要转导通路,这很可能是由脑肠轴调节功能异常导致的以消化道症状为主要表现形式的脾阳虚证脾失健运的生物学机制。