shRNA沉默ANGPTL4表达对大肠癌HT29细胞的生物学行为影响的研究

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ANGPTL4为血管生成素相关新基因,起初命名为pp1158,现已由人类基因(The Human Genome Organisation, HUGO)统一命名为ANGPTL4(angiopoietin-like 4)。该基因是全长基因,编码406个氨基酸,预计分子量为45.2 kDa。ANGPTL4为一分泌蛋白,它的编码基因定位于19p13.3染色体。迄今为止,已发现ANGPTL4在肝癌,肺癌,乳腺癌的发生发展中均起重要作用,但是其对大肠癌的作用却尚未见报道。目的:检测ANGPTL4在大肠癌病例中的表达情况以及探讨ANGPTL4基因在大肠癌发生、发展中的作用及相关的作用机制。方法:用半定量RT-PCR检测ANGPTL4在大肠癌病例组织与正常对照中的表达情况;用半定量RT-PCR检测ANGPTL4在大肠癌细胞株中的表达情况。通过shRNA体外转染,筛选稳定细胞株,获得ANGPTL4沉默的大肠癌细胞株,观察沉默ANGPTL4对细胞表型的影响,包括细胞的增殖能力,集落形成能力,细胞迁移能力等。结果:ANGPTL4在41.5%的临床大肠癌标本中表达,较正常组织中(19.5%)表达升高。ANGPTL4在多数大肠癌细胞株中表达。沉默ANGPTL4的大肠癌HT29细胞与对照细胞相比,集落形成能力增强,但细胞迁移能力降低,可能与促进VASP的磷酸化失活从而影响细胞伪足的形成有关。结论:ANGPTL4在大肠癌中表达升高,ANGPTL4可能在大肠癌的发生发展中起着重要作用。
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