【摘 要】
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研究背景及目的:卵巢癌（ovarian cancer,OC）是常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,由于早期缺乏有效的筛查手段和诊断方法,很多患者发觉身体不适时,已经出现了局部或远处转移,失去了最佳治疗时期,且晚期患者即使进行了卵巢癌标准治疗方案,生存率也并未显著提高,复发率也处于较高水平。近些年来,多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymers,PARP）抑制剂可以选择性
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研究背景及目的:卵巢癌（ovarian cancer,OC）是常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,由于早期缺乏有效的筛查手段和诊断方法,很多患者发觉身体不适时,已经出现了局部或远处转移,失去了最佳治疗时期,且晚期患者即使进行了卵巢癌标准治疗方案,生存率也并未显著提高,复发率也处于较高水平。近些年来,多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymers,PARP）抑制剂可以选择性靶向应用于BRCA1/2突变的卵巢癌患者,但临床上大多数患者是BRCA野生型卵巢癌,因此迫切需要研究出PARP抑制剂可能杀死BRCA野生型卵巢癌细胞的新策略。有研究证明PARP抑制剂联合铁死亡诱导剂可以抑制BRCA野生型卵巢癌细胞增殖,铁死亡是一种以脂质过氧化物积累为特征的铁依赖的细胞程序性坏死,且在多种癌症肿瘤中被证实有抑制肿瘤作用。Erastin是一种铁死亡诱导剂,能增加卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性,因此本文旨在探讨PARP抑制剂（Olaparib）能否诱导BRCA野生型卵巢癌发生铁死亡及与Erastin联合作用效果,以期为卵巢癌治疗提供新的思路。方法:1、细胞计数CCK-8法检测不同浓度的Olaparib对卵巢癌细胞系A2780的细胞活性和增殖能力的影响。2、倒置光学显微镜下观察卵巢癌细胞系A2780的形态和数量。3、通过活性氧（reactive oxygen species,ROS）和细胞丙二醛（malondialdehyde,MDA）检测试剂盒测定不同浓度的Olaparib处理卵巢癌细胞系A2780的铁死亡标志物的表达。4、蛋白免疫印迹（Western blot）实验检测不同浓度的Olaparib处理卵巢癌细胞系A2780的铁死亡关键蛋白SLC7A11的表达。5、细胞计数CCK-8法检测单独应用Erastin、Erastin联合5u M Olaparib和联合10u M Olaparib处理24h的卵巢癌细胞系A2780,观察对A2780细胞存活率的影响和IC50的变化。结果:1、细胞计数CCK-8法显示,不同药物浓度的Olaparib作用于卵巢癌细胞系A2780,其细胞活性和增殖能力显著低于对照组（P＜0.05）,且抑制能力随Olaparib作用时间的延长和浓度的增加逐渐增强。2、细胞ROS检测法和MDA检测法显示,用5u M、10u M浓度的Olaparib处理卵巢癌细胞系A2780,产生的ROS和MDA显著高于对照组（P＜0.01）,且ROS和MDA产量随Olaparib浓度的增加而增多。3、Western Blot实验证实,用5u M、10u M浓度的Olaparib处理卵巢癌细胞系A2780,SLC7A11蛋白表达量显著低于对照组（P＜0.05）,且SLC7A11的表达随Olaparib浓度的增加而减少。4、细胞计数CCK-8法显示,通过单独使用不同药物浓度的Erastin作用于卵巢癌细胞系A2780,其细胞活性和增殖能力显著低于对照组（P＜0.01）,且抑制能力随Erastin浓度的增加而增强。5、细胞计数CCK-8法显示,Olaparib联合Erastin作用于卵巢癌细胞系A2780,其细胞活性和增殖能力显著低于单独用药组。结论:1、Olaparib可能通过诱导BRCA野生型卵巢癌细胞铁死亡从而抑制细胞活性和增殖能力。2、Erastin可以增强Olaparib对BRCA野生型卵巢癌细胞的敏感性,且抑制作用与Erastin作用浓度有关。3、Olaparib对BRCA野生型卵巢癌细胞具有潜在的临床应用价值,有望成为BRCA野生型卵巢癌患者潜在治疗方案。
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