壳聚糖/肝素自组装膜的制备与性能研究

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壳聚糖作为一种生物高分子,可由虾、蟹壳中提取的甲壳素脱乙酰得到,具有无毒、来源广泛、生物相容性、生物降解性等优良性能,也是自然界中唯一的阳离子天然多糖。肝素是一种存在于人体内的糖胺聚糖,也是临床上常用的抗凝剂,为高度荷电的聚阴离子电解质。对材料表面进行修饰在生物医药方面有很多的应用,例如用LbL技术在固体表面组装一层聚电解质多层膜,可能会在医疗植入体的抗感染、免除炎症等方面有潜在应用。本文利用LbL静电自组装技术,在玻璃片表面组装壳聚糖/肝素多层膜,并用AFM研究其表面形貌,由QCM结合SAXS和接触角分析膜的生长过程。最后,通过抗凝血实验表征膜表面的抗凝血性能,探究壳聚糖/肝素自组装膜在医疗植入体方面的应用。主要内容如下:(1)从大闸蟹背壳中提取甲壳素,并用微波-碱液法制取壳聚糖,然后用电位滴定法测定其脱乙酰度,乌式粘度计测定其分子量,同时与两种市售产品进行对比;结果表明:电位滴定测得自制壳聚糖样品的脱乙酰度为77.49%,而聚源和国药两公司所售壳聚糖的脱乙酰度分别为84.93%、81.69%;乌式粘度计测得自制壳聚糖样品的粘均分子量为8.1×106,而聚源和国药两公司所售壳聚糖的粘均分子量分别为2.2×105、5.7×105。红外结果证明壳聚糖的分子结构;AFM结果说明国药公司壳聚糖样品的成膜性最好,后续试验中选用该样品制备聚电解质多层膜。(2)用化学修饰的方法分别对玻璃基片三步处理,得到戊二醛偶联剂修饰的基片并用接触角测量仪、AFM、红外等表征;在戊二醛修饰的基片上交替组装浓度为1mg/ml, pH=3.5的壳聚糖溶液,浓度为1mg/ml, pH=6.9的肝素溶液,得到壳聚糖/肝素自组装多层膜。用AFM观察膜的表面形貌、接触角测量仪观察膜的表面润湿性、小角X射线衍射、QCM等监测膜的生长情况。(3)用表面引发-原子转移自由基聚合的方法,经过四步反应在玻璃基片表面接枝N-羟甲基丙烯酰胺聚合物分子刷,并进行表征。在分子刷修饰的基片表面组装1mg/ml, pH=3.5的壳聚糖与1mg/ml, pH=6.9的肝素,得到多层膜。并用AFM、接触角测量仪等进行表征。(4)上述组装有壳聚糖/肝素自组装膜的基片进行初步的凝血实验,探究其抗凝血性能。
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