论文部分内容阅读
目的:研究紫杉醇对APC、DKK-3基因甲基化水平的调控,及对宫颈癌Caski细胞增殖的影响,为DNA甲基化用于宫颈癌诊断和治疗提供依据。方法:紫杉醇浓度分别为0、1、5、10、20、40、80、160、320μmol/L处理宫颈癌Caski细胞株,MTT法绘制细胞生长;20μmol/L紫杉醇处理宫颈癌Caski细胞株,观察不同时间点24 h、36 h、48 h对宫颈癌细胞的生长抑制作用;不同浓度紫杉醇分别处理宫颈癌Caski细胞株,RT-PCR检测APC、DKK-3 mRNA表达水平;20μmol/L紫杉醇处理宫颈癌Caski细胞株24 h、36h、48 h后,RT-PCR检测APC、DKK-3 mRNA表达水平;不同浓度紫杉醇分别处理宫颈癌Caski细胞株,甲基化特异性PCR检测APC、DKK-3启动子甲基化水平;20μmol/L紫杉醇处理宫颈癌Caski细胞株24 h、36 h、48 h后,甲基化特异性PCR检测APC、DKK-3启动子甲基化水平。结果:1.当不同浓度紫杉醇处理Caski细胞24h后,细胞的抑制率随着紫杉醇浓度的增加而抑制率呈上升趋势,不同处理组之间抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。紫杉醇对Caski细胞的生长抑制具有剂量依赖效应。2.选取紫杉醇浓度为20μmol/L,处理24 h、36h、48h后,对Caski细胞的抑制率分别为(51.1±1.5)%、(57.2±1.6)%、(64.7±2.1)%,在不同时间点之间的细胞抑制率比较差异有统计学意义(P<0.01)。紫杉醇对Caski细胞的生长抑制有时间依赖效应。3.1μmol/L的紫杉醇作用时,APC、DKK-3 mRNA表达水平与未处理时比较,差异无统计学意义(p>0.05);从5μmol/L开始,随着紫杉醇浓度的增大,Caski细胞APC、DKK-3 mRNA表达水平明显增加。4.1μmol/L紫杉醇处理组,在24h、48h及72h时间点上,APC、DKK-3启动子甲基化水平比较差异无统计学意义(p>0.05);从5μmol/L开始,随着紫杉醇浓度的增加,以及处理时间延长,Caski细胞中APC、DKK-3启动子甲基化水逐渐降低,不同浓度和时间点比较,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:1.紫杉醇可抑制Caski细胞增殖呈剂量依赖性和时间依赖性。2.紫杉醇抑制Caski细胞增殖,可能与下调APC、DKK-3启动子甲基化水平有关。